Cromatografiade Troca Iônica:Separação das proteinas baseadas nas suas cargas líquidas

Cromatografiade Filtração em gel:Separação das proteinas baseadas nos seus tamanhos (pesos moleculares)

Cromatografiade Afinidade:Separação das proteinas baseadas nas suas Afinidades específicaspara outras moléculasou proteínas.

Eletroforese: SDS-PAGE = “sodium dodecyl sulphate polyacrilamidegel electrophoresis”

Gel de SDS-PAGE“corado”com “azul deCoomassie”

Eletroforese isoelétrica

EletroforeseBidimensional

Resultado de um gel bidimensional de todas as proteínas num tipo decélula

Espectometria de massaMALDI MS: Matrix-Assisted Laser Desorption/ Adsorption Mass Spectroscopy

ESI MS: Electroscpray Ionization MS

Pico a: (m/z)a = (M + nxp)/n2Pico a+1: (m/z)a+1= (M+(n+1)xp)/(n+1)

Onde M = massa da proteinan = número de cargas no Pico “a”p = massa de de um proton

Duas equações e duas variáveis não conhecidas:Logo, pode determinar o valor de M com alta precisão

• Espectometria de massa

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