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Cinética Microbiana

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Cinética Microbiana

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Hidrólise

Glicose Piruvato

8 ATP

Ciclo de Krebs30 ATP

CO2 O2

Produtos de Fermentação( lactato, álcoois, ácidos, etc.)

6 ATP

Respiração Aeróbia

Respiração Anaeróbia(CO2, SO4

2-, NO3-)

Figura 1: Esquema simplificado de processos aeróbios e anaeróbios

Sacarose

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• Processos aeróbios: oxigênio como aceptor final de elétrons;

• Processos anaeróbios:

• Fermentativos: Utilizam produtos da degradação do substrato.

Rendimento Energético

Processos aeróbios > Processos anaeróbios

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BALANÇO ENERGÉTICO NA RESPIRAÇÃO

100g de Açúcar 380 kcal(100%)

47g Biomassa

264g de CO2

Calor212 kcal(56%)

ATP168 kcal(44%)

O2 108 g de

H2O

38ATP

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BALANÇO ENERGÉTICO NA FERMENTAÇÃO

100g de Açúcar 380 kcal(100%)

51,1g de Álcool380 kcal(100%)

48,9g de CO2

Calor380 kcal(4,6%)

ATP9 kcal(2,4%)

1-5 g de Biomassa

2ATP

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Estudo Cinético

Processo obedece ao princípio de conservação da matéria

Substrato

Síntese Manutenção

Fonte de Nitrogênio

Elementos minerais: Fósforo, enxofre, cobre, cácio, etc.

CCWWHHXXOOYYNNZZ+aO+aO22+bH+bHggOOhhNNii cCH cCHjjOOkkNN11+dCO+dCO22+eH+eH22O+fCO+fCmmHHppOOqqNNrr

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Estudo Cinético

Processo obedece ao princípio de conservação da matéria

CCWWHHXXOOYYNNZZ+aO+aO22+bH+bHggOOhhNNii cCH cCHjjOOkkNN11+dCO+dCO22+eH+eH22O+fCO+fCmmHHppOOqqNNrr

Carbono: w=c+d+fmHidrogênio: x+bg=cj+2e+fpOxigênio: y+2a+bh=ck+2d+e+fgNitrogênio: z+bi=cl+fr

A composição da fonte de carbono, em principio é conhecida;A composição da média da biomassa, também é conhecida;Portanto resultam: quatro equações

seis incógnitasComo prosseguir?Quando se pretende produzir biomassa o número de incógnitas se reduz a cinco;O quociente d/a=quociente respiratório é um dado experimental;

Assim o sistema com quatro equações permite determinar os coeficientes estequíométricos a, b, c, d, e

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Estudo Cinético

Processo obedece ao princípio de conservação da matéria

Substrato

Síntese Manutenção

Fonte de Nitrogênio

Elementos minerais: Fósforo, enxofre, cobre, cácio, etc.

CCWWHHXXOOYYNNZZ+aO+aO22+bH+bHggOOhhNNii cCH cCHjjOOkkNN11+dCO+dCO22+eH+eH22O+fCO+fCmmHHppOOqqNNrr

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ESTEQUIOMETRIA

• GRAU DE REDUÇÃO: número de moles de eltrons disponíveis por átomo grama de carbono para serem transferidos para o oxigênio

Considera-se H, como unidade de potencial de redox;(C, O, N, S, P) = (+4, -2, -3, 6, 5)Define-se um composto neutro para cada elemento:Carbono: (CO2)Oxigênio: (H2O)Nitrogênio:(NH3)Enxofre: H2SO4

Fósforo: H3PO4

O grau de redução da fonte de carbono da biomassa e do produto pode ser calculado por:

ys=(4w+x-2y-3z)/wyb=4+j-2k-3lyp=(4m+p-2q-3r)/m

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Métodos para avaliação de crescimento de microrganismos

Fisiologia do microrganismo!

Métodos Diretos

• Determinação da concentração celular

• Contagem no microscópio;

• Contagens com cultura;

• Contagem eletrônica.Não se aplicam a m.o. filamentosos

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Figura 2: Contagem em Câmara de Neubauer

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Figura 3: Contagem de Células Viáveis em placas

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• Determinação da biomassa microbiana

• Matéria seca;

• Medidas óticas.

Figura 4: Separação de células por filtração

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Métodos Indiretos

• Constituintes celulares (ATP, DNA, NADH);

• Dosagem de elementos do meio de cultura (substrato, consumo de

O2, propriedades reológicas do meio de cultura, entre outros.

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Processo Fermentativo

Fermentador

Microrganismo

Preparo do inóculo

Nutrientes

Preparo do meio

Esterilização do meio

Controles

Esterilização do ar Recuperação do produto

Ar

Tratamento de efluente

Produto

Resíduo

Figura 5: Etapas de um processo fermentativo

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Obtenção de uma curva de crescimento para um M.O.

Figura 6: Processo para obtenção de uma curva de crescimento

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Con

cent

raçã

o (g

/L)

Tempo de Cultivo (h)

Biomassa

Produto

Substrato

Figura 7 : Curvas de crescimento de biomassa, consumo de substrato e formação produto

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Curva de crescimento

Condições favoráveis ao microrganismo

Figura 8: Curva típica de crescimento bacteriano

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• Fase lag

• Rearranjo do sistema enzimático (síntese de enzimas);

• Traumas físicos (choque térmico, radiação, entre outros);

• Traumas químicos (produtos tóxicos, meio de cultura).

Não há variação da concentração de biomassa no tempo,

portanto:XocteX

Xo = concentração celular no tempo t =0

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• Fase log ou exponencial

• Células plenamente adaptadas;

• Velocidades de crescimento elevadas;

• Consumo de substrato;

• Interesse prático.

• Fase de redução de velocidade

• Diminuição da concentração de substrato limitante;

• Acúmulo de produto(s) no meio

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• Fase estacionária

• Término do substrato limitante;

• Acúmulo de produtos tóxicos;

• Concentração celular constante em seu valor máximo.

• Fase de declínio

• Redução do crescimento celular;

• Consumo de material intracelular (lise).

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Dispondo de um conjunto de dados experimentais de X,

S e P em função do tempo tem-se:

dt

dp

dt

ds

dt

dxpsx ;;

Crescimento Consumo Formação

Não são os melhores parâmetros para se

avaliar o estado em que se encontram o

sistema.

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Velocidades específicas:

• Crescimento: dt

dX

X

1

• Consumo de substrato:dt

dS

Xs

1

• Formação de produto: dt

dP

Xp

1

Distribuindo os dados da fase exponencial em

coordenadas semilogarítmicas, tem-se:

dt

dX

Xdt

Xd 1)ln(

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Como essa fase tem a distribuição de uma reta a velocidade específica de crescimento é constante e máxima.

)(loglog 0 imi ttXX

X0i= Concentração celular no instante de início da fase exponencial

Rearranjando a equação anterior:

)(0

titi

meXX

Ou, re-escrevendo de outra forma, tem-se:

tXX mi 0lnln

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Assim, pode-se obter o tempo de duplicação da biomassa,

onde X=2X0i:

m

Tdup

2ln

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Fator de conversão de substrato a células

SS

XXY SX

0

0/

X0= Concentração celular inicial

X= Concentração celular no instante t

S0= Concentração inicial do substrato

S= Concentração residual do substrato no instante t.

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Este parâmetro é importante para a determinação de X em

cultivo de fungos filamentosos e em processos de

tratamento de efluentes.

O fator de conversão pode ser obtido também através de:

SSXY

/

Coeficiente de Manutenção

SXSS Ym

/'

Velocidade específica de consumo de substrato para manutenção da viabilidade celular

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Produtividade

F

F

T

XXP 0

X0= Biomassa inicial;

XF= Biomassa final;

TF= Tempo total de cultivo.

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