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  • UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARAN CENTRO DE CINCIAS

    BIOLGICAS E DA SADE PROGRAMA DE PS-GRADUAO STRICTO SENSU EM

    CINCIAS AMBIENTAIS NVEL MESTRADO

    CAMILA BEATRIZ SANTANA

    COMPOSIO QUMICA, ATIVIDADE ANTIMICROBIANA, INSETICIDA E

    ANTIOXIDANTE DO LEO ESSENCIAL E EXTRATOS DE Myrcia oblongata DC

    CHEMICAL COMPOSITION, ANTIMICROBIAL ACTIVITY, INSECTICIDE AND

    ANTIOXIDANT OF ESSENTIAL OIL AND EXTRACTS OF Myrcia oblongata DC.

    .

    CASCAVEL-PR

    MAIO/2017

  • CAMILA BEATRIZ SANTANA

    COMPOSIO QUMICA, ATIVIDADE ANTIMICROBIANA, INSETICIDA E

    ANTIOXIDANTE DO LEO ESSENCIAL E EXTRATOS DE Myrcia oblongata DC.

    Dissertao apresentado ao Programa de Ps-graduao

    Stricto Sensu em Cincias Ambientais Nvel

    Mestrado, do Centro de Cincias Biolgicas e da

    Sade, da Universidade estadual do Oeste do Paran,

    como requisito parcial para a obteno do ttulo de

    Mestre em Cincias Ambientais.

    rea de Concentrao: Cincias Ambientais

    Orientador: Fabiana Gisele da Silva Pinto

    CASCAVEL-PR

    Maio/2017

  • RESUMO

    Os produtos do metabolismo secundrio das plantas tm despertado grande interesse econmico

    pela sua diversidade qumica e atividades biolgicas. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi

    determinar a composio qumica dos extratos vegetais de Myrcia oblongata, avaliar o potencial

    antioxidante destes extratos, testar a atividade antimicrobiana frente a onze microrganismos

    padres e dez sorotipos de Salmonella spp. de origem avcola, bem como avaliar o potencial de

    mortalidade dos extratos e leo essencial sobre Alphitobius diaperinus. Foram identificados

    saponinas, esterides, triterpenides, taninos e flavonides. Os extratos apresentaram atividade

    para todos os microrganismos testados, com exceo do extrato metanlico que no demonstrou

    atividade para P. mirabilis e S. Enteritidis. O extrato hexnico, acetato de etila e acetona possuem

    atividade antioxidante. O leo essencial e os extratos de hexano, etanlico, metanlico e de

    acetato de etila apresentaram elevados ndices de mortalidade sobre a larva de A. diaperinus. Para

    os adultos os melhores resultados foram obtidos para o leo essencial, com mortalidade superior a

    80%. Os resultados direcionam a importncia de estudos para compreender o potencial e a ao de

    extratos vegetais e leos essenciais, visando diminuio de impactos causados pelo uso

    extensivo de antimicrobianos e antioxidantes sintticos e pelo uso indevido de substncias

    qumicas para o controle de pragas.

    Palavras-chave: avicultura, fitoqumica, Salmonella, inseticida, microdiluio, pragas

    ABSTRACT

    The products of secondary plant metabolism have aroused great economic interest in their

    chemical diversity and biological activities. The objective of this work was to determine the

    chemical composition of Myrcia oblongata extracts, to evaluate the antioxidant potential of

    these extracts, to test the antimicrobial activity against eleven standard microorganisms and

    ten serotypes of Salmonella spp. Of poultry origin, as well as to evaluate the potential

    mortality of extracts and essential oil on Alphitobius diaperinus. Saponins, steroids,

    triterpenoids, tannins and flavonoids have been identified. The extracts presented activity for

    all microorganisms tested, except for the methanolic extract that did not show activity for P.

    mirabilis and S. Enteritidis. The hexane extract, ethyl acetate and acetone have antioxidant

    activity. The essential oil and extracts of hexane, ethanolic, methanolic and ethyl acetate

    showed high mortality rates on A. diaperinus larvae. For adults, the best results were obtained

    for essential oil, with a mortality greater than 80%. The results point to the importance of

    studies to understand the potential and action of plant extracts and essential oils, aiming at

    reducing the impacts caused by the extensive use of antimicrobials and synthetic antioxidants

    and by the undue use of chemical substances for pest control.

  • Key words: poultry farming, phytochemistry, Salmonella, insecticide, microdilution, pests

  • A pacincia diretamente proporcional ao propsito. Se voc realmente quer, sabe o que

    quer, voc tem pacincia.

    Dr. Celso Charuri

  • DEDICATRIA

    Dedico minha Famlia e aos verdadeiros Amigos.

  • AGRADECIMENTOS

    Deus, pela Vida.

    Aos meus pais Hamilton e Rejane e a minha irm Anna Paula por toda compreenso,

    dedicao e ensinamentos. Que me ensinam Coragem e Fortaleza nos momentos difceis e

    que compartilham as Alegrias. Mostram-me como tudo cclico e que independente do ciclo

    que eu esteja, tenho a certeza que vocs estaro por perto.

    A minha filha Isadora, por me ajudar a chegar mais perto de sentir o Amor verdadeiro.

    Agradeo ao meu namorado, Joo Pedro, por mostrar que a Vida pode ser leve e engraada,

    me ajudar a ser persistente e paciente, por me equilibrar sempre. Norimar e Selma que me

    tratam como filha, me sinto da famlia de vocs.

    A minha orientadora, Dra. Fabiana Gisele da Silva Pinto, que mesmo depois de tantas

    tribulaes, continuou confiando no meu trabalho. Muito obrigada! Aos antigos e novos

    colegas de laboratrio Juliete, Adrieli, Cristiane, Thas, Ana, Camila, Marina, Adriana,

    Jovana, Mayara e Rafaela cada uma com suas peculiaridades, suas

    caractersticas e diferenas que sem perceber me ajudam a ser algum melhor. Meninas, gosto

    muito de vocs! Andreia (Boni), com uma pacincia enorme, sempre ajudando (independente

    de quem seja), sempre resolvendo os problemas de todos, sem voc seria muito difcil!

    Obrigada mesmo!

    Aos professores (principalmente Fabiana, Luis, Ana Tereza e Miryan) e aos colegas de

    mestrado que pela convivncia me ajudaram a reconhecer e a lidar com as diferenas de cada

    um.

    Aos verdadeiros Amigos, mas principalmente a deles que pelo exemplo, me ensinou

    Princpios, mostrou-me o verdadeiro sentido da Vida. Meu eterno agradecimento.

  • Sumrio

    Reviso bibliogrfica ............................................................................................................. 9

    Captulo 1. Composio qumica, potencial antimicrobiano, antioxidante, acaricida e de

    repelncia do leo essencial de Myrcia oblongata DC .......................................................... 17

    Captulo 2. Atividades biolgicas do leo essencial e extratos vegetais de Myrcia oblongata 36

    Anexo 1: Normas para submisso do primeiro artigo: Brazilian Journal of Biology.............. 60

    Anexo 2: Normas da revista Medical and Veterinary Entomology ........................................ 66

  • 9

    Reviso bibliogrfica

    Setor avcola

    A avicultura brasileira ocupa desde 2011 a liderana na exportao de carne de frango,

    alm de ser o terceiro maior produtor mundial, produzindo um total de 13,14 milhes de

    toneladas ao ano (Ubabef, 2016). O aumento da produtividade avcola vinculou-se a

    inovaes na tecnologia de produo e a novos mtodos de processamento desta carne,

    visando diminuir o tempo e o custo de produo (Palermo, 2015).

    Para diminuir o tempo de produo, a nutrio dos frangos tambm foi incrementada

    com minerais, vitaminas e antimicrobianos. Estes ltimos so utilizados neste setor para

    tratamento de enfermidades, infeces e como promotores de crescimento (Belusso;

    Hespanhol, 2010). O termo, antibiticos promotores de crescimento (APC) muito

    utilizado na indstria, apesar de no ser conceitualmente correto. Este termo, deriva do efeito

    positivo que os antimicrobianos possuem sobre o crescimento das aves. Entretanto, estes

    antimicrobianos so adicionados s raes, em dosagens abaixo da utilizada no tratamento de

    doenas, o que pode gerar problemas relacionados resistncia microbiana (Rutz, 2007).

    A utilizao dos APC ao longo dos anos foi interessante no desempenho das aves,

    porm em 1959 foi discutido o primeiro caso de uma possvel resistncia bacteriana com a

    utilizao de clortetraciclina (Elliot; Barnes, 1959). Este padro de resistncia foi sendo cada

    vez mais notificado, at que em 2006 uma deciso da Unio Europeia afetou o mercado de

    exportao de carne de frango brasileira, devido proibio da utilizao dos antimicrobianos

    como APC. Esta proibio provocou uma adequao para atender a demanda do mercado

    externo (Rutz, 2007).

    No Brasil, o Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA) ao lado da

    ANVISA (Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria vinculada ao Ministrio da Sade)

    regulamentam o uso teraputico e como APC dos antimicrobianos na avicultura. Esta

    regulamentao tem o intuito de reduzir a seleo de bactrias resistentes aos antimicrobianos,

    no entanto mesmo que os APC sejam permitidos com restrio no Brasil, ainda h muitos

    problemas de resistncia microbiana (Ubabef, 2014; Palermo, 2015).

    Outro problema que gera resistncia microbiana no setor avcola o uso indevido de

    inseticidas qumicos, para o controle de insetos pragas. Estes insetos tais como o Alphitobius

    diaperinus (Coleoptera: Tenebrionidae) e Dermanyssus gallinae (Acari: Dermanyssidae),

    conhecido como cascudinho e piolho de galinha respectivamente, so geralmente

    controlados com piretrides e organofosforados (Lambkin; Furlong, 2011). Porm, estes e

  • 10

    pr