Biotecnologia da Reprodução

Prof. Msc. Marcelo Arne Feckinghaus

Bases Fisiológicas

• Fases do ciclo estral Proestro, estro, metaestro e diestro Interações entre SNC e órgãos genitais

• Hipotálamo controla hipófise Hormônios liberação pulsátil GnRH Receptores específicos (adeno-hipófise)

Bases Fisiológicas

• PGA modula resposta GnRH ↓ freqüência do pulso de GnRH

• Estrógeno Ação depende da PGA Fase Luteínica: ↓ freqüência GnRH Fase Folicular (pré-ovulatória): ↑ freqüência GnRH

Bases Fisiológicas

• Interferências Ambiente (temperatura, fotoperíodo) Estado nutricional Manejo do rebanho Estresse Amamentação Opióides endógenos inibem GnRH

Feromônios masculinos

Bases Fisiológicas

• Inibição hormonal Inibina Supressão de FSH

• LH regulado pelo GnRH PGA influencia Balanço energético Amamentação

FSH X LH

Superovulação

• Mecanismo exato de recrutamento desconhecido

• Dominância e atresia

• Relação com FSH

• Ondas foliculares 2 até 3 depende da fase luteínica

Superovulação

• Definição:

Método de estimulação folicular para desenvolvimento de DIVERSOS folículos terciários até a ovulação

Superovulação

• Simplificando:Suprir deficiência de FSH antes que o folículo dominante cause a diminuição endógena do mesmo!

Neutralização da dominância

Superovulação

• Inibição: Ativa X Passiva Passiva = ↓ [] de FSH até a incombatibilidade Ativa = Substâncias ↓ sensibilidade a GnRH

• Alternativas Gonadotrofinas (eCG, hCG e FSH) Resposta variada

Superovulação

• Variações: Imprecisão na sincronia ovariana Atividade biológica Dose Idade e raça da doadora Fatores individuais

Superovulação

• Emergência (início) da onda folicular

• Melhor resposta ao FSH

• Antes da dominância

Fecundação e Desenvolvimento

• Tempo de capacitação Mudanças bioquímicas e estruturais Remoção de substâncias (plasma seminal) Entrada de cálcio = Atividade flagelar Reação acrossômica = poder de penetração

• Maior durabilidade do espermatozóide Oócito = 20 -24 horas Espermatozóide (sptz) = 24 – 48 horas

Fecundação e Desenvolvimento

• Fecundação 6 horas após a ovulação

• Inseminação antes da ovulação

• Primeiro contato corona radiata e zona pelúcida

• Pressão estimula a fusão das membranas (acrossomal e plasmática)

Fecundação e Desenvolvimento

• Pontos de fusão liberação de enzimas = Penetração

• Ruptura + Penetração = Restabelecimento da ZP

• Reinício da meiose (pronúcleos)

• Formação do zigoto

Fecundação e Desenvolvimento

• Aproximação e junção dos pronúcleos = singamia

• Divisões mitóticas = clivagem

• Blastômeros = ↓ tamanho e ↑ número

• ↑ força de coesão celular = compactação celular = mórula

Fecundação e Desenvolvimento

• 13 a 32 blastômeros = 4 a 5 dias

• Divisão e especialização celular = blastocisto inicial

• Embrioblastos e trofoblastos Feto e placenta

Fecundação e Desenvolvimento

• Blastocele = cavidade

• Pressão = Rompimento da zona pelúcida

• Blastocisto eclodido

• Melhores resultados antes da eclosão

Dia 2 = 4 células

Dia 3 = 8 células

Dia 4 = 16 células

Dia 5 ou 6 = Mórula

Dia 6 -7 = Blastocisto

Dia 7 – 8 = Blastocisto Expandido

Dia 8 – 9 = Blastocisto Eclodido