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Page 1: AVALIAÇÃO DA QUALIDADE FÍSICO-QUÍMICA DE ÁGUAS ... · No laboratório foram realizadas análises, segundo o Manual Prático de Análise de Água (FUNASA, 2006) e (APHA, 2005)

Resumo: 01.001

AVALIAÇÃO DA QUALIDADE FÍSICO-QUÍMICA DE ÁGUAS FLUVIAIS NOS MUNICÍPIO DE GUAPIMIRIM E CACHOEIRA DE MACACU - RJ.

Autores 1PEREIRA, P. S.

1, VALIN, V.

1, SANTOS, J. A. A.

1 Biologia - IOC

Apoio Financeiro: Instituto Oswaldo Cruz/IOC

Resumo Introdução Monitoramento físico-químico de rios, riachos, lagos e lagoas, são fatores de real importância em áreas de preservação ambiental. Sendo tema de relevância e considerando as diversas alterações físico-químicas que podem ser provocadas no meio ambiente pelo despejo de substâncias, que podem levar a desequilíbrios, merecem ser avaliada. Uma das formas de avaliação é a análise físico-química da água. Objetivos O objetivo foi avaliar a variação de alguns parâmetros físico-químicos nas águas dos rios nos Município de Guapimirim e Cachoeira de Macacu - RJ. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Foram coletadas amostras bimestrais no Complexo Hidrográfico Guapiaçu-Macacu, um total de 72 amostras de água em 12 pontos de coletas no período de maio/2008 a junho/2009. Para as coletas foram utilizados frascos apropriados e as amostras coletadas foram mantidas sob-refrigeração e transportadas até o laboratório de Avaliação e Promoção da Saúde Ambiental/IOC/FIOCRUZ para serem analisadas. No laboratório foram realizadas análises, segundo o Manual Prático de Análise de Água (FUNASA, 2006) e (APHA, 2005) das amostras coletadas para os parâmetros: dureza, (método do EDTA), alcalinidade, (método titulométrico com indicadores), cloretos, (método de MOHR), nitrogênio (método de digestão persulfato), fósforo (método digestão do persulfato em ácido) pH (método potenciométrico), oxigênio dissolvido (método eletrométrico), sólidos totais dissolvidos e condutividade (método eletrométrico). Resultados Os resultados obtidos durante o período do estudo foram: o maior valor para Nitrogênio foi no ponto 11, com 3,28 mg/L ± 5,7. Fósforo apresentou maior valor no ponto 3, com 0,62 mg/L P ± 0,17. A dureza total foi no ponto 1 com 16,26 mg/L CaCO3 ± 2,9. Para o pH, o maior valor foi no ponto 9, com 7,12 ± 0,45. Oxigênio dissolvido foi maior no ponto 9, com 6,85 mg/l O2 ± 0,96. Cloretos foi maior no ponto 3, com 10,01 mg/L Cl¯ ± 2,77. A maior condutividade obtida foi no ponto 1, com 39,45 µS/cm ± 11,33. A maior alcalinidade encontrada foi no ponto 2, com 16,08 mg/L CaCO3 ± 4,39. Para STD obtivemos o maior resultado no ponto 1, com 18,85 mg/L ± 5,13. Os resultados das análises químicas foram interpretados segundo os padrões de qualidade estabelecidos para águas de Classe 1, na Resolução CONAMA N0 357, de 17 de março de 2005. Com os dados obtidos, realizamos a análise de variância ANOVA com pós-teste. No período de maio/2008 a junho/2009, os parâmetros de nitrogênio apresentou valor de p = 0,4414; fósforo p = 0,0524; dureza total apresentou valor de p = 0,0001; pH, valor p = 0,0001; oxigênio dissolvido apresentou valor de p = 0,0001; cloretos com p = 0,6204; condutividade com p = 0,0001; alcalinidade total com p = 0,6808 e STD com p = 0,0001.

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Conclusão Concluímos que, houve alterações dos parâmetros físico-químicos, nos períodos das coletas e entre as amostras, entretanto, os valores para os parâmetros analisados, se mantiveram, dentro dos valores máximos permitidos pela Legislação Brasileira.

Palavras-chaves: Monitoramento químico, Águas superficiais, Qualidade química

Resumo: 01.002

INFLUENCE OF ENVIRONMENTAL AND MORPHOMETRIC PARAMETERS ON THE CELLULARITY OF Echinometra lucunter SEA URCHIN COELOMOCYTES

Autores 1Lima-Santos, L.

1, Honorato, T. B. M.

2, Manzano-Sarabia, M.

2, Hurtado, M.A.

1, Marques-Santos,

L.F. 1 Departamento de Biologia Molecular - UFPB,

2 Facultad de Ciencias del Mar - UAS

Apoio Financeiro: CNPq

Resumo Introdução Sea urchin coelomic fluid contains coelomocytes which comprised four cellular subpopulations: phagocytes, vibratile cells, red spherulocytes and colorless spherulocytes. These cells are involved in several effector mechanisms of innate immunity. Recent studies have shown that physical (Cell Stress Chaperon. 5:113, 2000) or chemical (Cell Biol Toxicol. 24:541, 2008) stresses induce alterations on sea urchin coelomocytes subpopulations, which qualifies these cells as biosensors. Objetivos The aim of the present work was to investigate the influence of environmental parameters and sea urchin morphometry on Total Coelomocytes Concentration (TCC) and Differential Coelomocytes Counts (DCC) of the Echinometra lucunter. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Animals (N=145) were sampled monthly from July 2011 to June 2012 at João Pessoa coast, Paraíba, Brazil (7o 08′54″S and 34o 47′44″ O; ICMBio authorization codes: 11545-1 and 32105-1) and maintained in aquarium with constant airflow. The weight of animals and the carapace volume was measured before coelomocytes sampling. The coelomic fluid was withdrawn by puncture at peristomial membrane with a syringe preloaded with ISO-EDTA anticoagulant solution. TCC (cells ⁄ mL) and DCC (%) was estimated under phase contrast microscopy. Sex identification was determined after induced spawning (intracoelomic injection of KCl, 0.5M). Environmental data of precipitation (PREC) were collected at INMET (Instituto Nacional de Metereologia). Sea surface temperature (SST), photosynthetically active radiation (PAR), chlorophyll

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a (Chl) and net primary production (NET) were collected from satellite-derived data. The monthly means of the environmental data were used for statistical analysis. Student's t-test was performed to analyze the influence of sex on TCC and DCC. Spearman test was used to correlate the morphometric and environmental data with TCC and DCC. Data are presented as mean ± standard deviation. Resultados The results of the present work showed that the TCC (5.22 ± 2.85 x 10x6 cells ⁄ mL) ranged from 1.74 - 18.06 x 10x6 cells ⁄ mL. The phagocytes (55.83 ± 15.68%) were the most abundant cell type, followed by vibratile cells (34.85 ± 13.81%), red spherulocytes (6.56 ± 5.76%) and colorless spherulocytes (2.89 ± 3.25%). There was no difference between the genders regarding TCC and DCC. The animals weight showed a negative correlation with cellular concentration (r = − 0.215; p < 0.001) and was negatively correlated with PAR (r = −0.182; P < 0.01) while vibratile cells exhibited a positive correlation (r = 0.177; P <0.05). Conclusão Our data show that the sea urchin E. lucunter coelomocytes respond to some environmental parameters through TCC and DCC fluctuations making them a useful biosensor for the monitoring of environmental changes.

Palavras-chaves: Coelomocytes, Sea Urchin, Environmental, Immune System, Marine Invertebrate

Resumo: 01.003

ANÁLISE DA DINÂMICA DOS CORPÚSCULOS LIPÍDICOS DE Ustilago maydis

Autores

1,2,3AGUILAR, L. R.

1, GUERRA-SÁNCHEZ, G

2, PARDO-VÁZQUEZ JP

3, LOMELI, M. M.

1

Departamento de microbiologia, ENCB - IPN, 2 Facultad de Medicina, Depto. Bioquimica y Biologia

molecular - UNAM, 3 Instituto de bioquimica medica - UFRJ

Apoio Financeiro: CONACYT, MÉXICO: CNPq-Brasil, FAPERJ

Resumo Introdução Ustilago maydis é um fungo dimórfico, causador da doença conhecida como carvão-comum do milho. O metabolismo de lipídeos em U. maydis , assim como em células eucarióticas está associado com organelas chamadas corpúsulos lipídicos (CL). Os CL armazenam lípidos neutros, principalmente triacilgliceróis e ésteres de esteróis. Na levedura Saccharomyces cerevisiae os CL são organelas dinâmicas, pois tem sido observado que estes são consumidos em resposta a estímulos proliferativos, como a adição de um meio rico a células em fase estacionária. Objetivos Estabelecer um método de determinação de corpúsculos lipídicos e analisar a dinâmica dos corpúsculos lipídicos em durante o crescimento em diferentes meios. Código de Experimentação Animal

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Código de Experimentação Humana Métodos A cepa haplóide FB2 de U. maydis foi cultivada em meio YPD (1% extrato de levedura, 2% de glicose e 0,25% de peptona), meio mínimo (MM)(1% glicose, elementos traço e cocktail de sais minerais), ou meio mínimo mais uréia (MM+ 20mM ureia) durante 48 horas. Alíquotas foram retiradas em diferentes tempos para determinação de crescimento (absorção a 600nm) e para determinação do índice de CL. Para medir o índice de CL utilizamos o método de recuperação de fluorescência no qual células são fixadas em formaldeído 37% e resuspensas tampão de leitura contendo a sonda hidrofóbica fluorescente BODIPY em 200 mMKI. Após a adição de células a fluorescência foi medida (EX 480 nm/EM 510). Paralelamente as células foram quantificadas por absorbância a 600 nm. As leituras de fluorescência foram normalizadas com a quantidade de células, chamada de índice de CL (n=3 ± SD). Resultados Utilizamos o método de recuperação de fluorescência para quantificar o índice de CL durante o crescimento de U. maydis em meio rico YPD. Mostramos que a dinâmica de CL é diferente a dinâmica observada em S. cerevisiae, mostrando dois etapas. A adição de meio rico (YPD) promove a síntese de CL, chegando a um índice de CL de 3213,42 ± 346,48 (n=3), seguido de uma fase lipolítica, aonde leveduras passam a consumir os CL diminuindo o índice de CL a 2913,95 ± 148,65 (n=3). Esta dinâmica foi diferente em meio mínimo sem nitrogênio onde se observou um acúmulo maior chegando a um índice de 24242,48 ± 1480,57 (n=3). Em meio com uréia observamos só uma fase de formação de CL depois de 12 horas de incubação chegando a um índice de 12115,65 ± 607,045 (n=3) e um crescimento 30% menor em comparaçao com meio rico YPD. Conclusão O método desenvolvido por Bozaquel-Morais et al . 2010 para o estudo de CL foi o método de alto rendimento e fácil aplicação que permitiu estudar a dinâmica dos CL em U. maydis . As leveduras em fase estacionária respondem a adição de meio novo, consumindo os corpúsculos lipídicos armazenados devido ao estresse nutricional causado pelo esgotamento de nutrientes no meio de pré−cultura.

Palavras-chaves: Corpusculos lipidicos, metabolismo central, estresse nutricional, Ustilago maydis

Resumo: 01.004

Diferença da temperatura na incubação de fungos filamentosos, isolados da água utilizada na reabilitação de Pinguins-de-Magalhães.

Autores

1POESTER, V. R.

4, KLAFKE, G. B.

3, ADORNES, A. C.

3, FILHO, R. P. D. S.

4, XAVIER, M. O.

2

Ciências Biológicas - FURG, 3 Centro de Reabilitação de Animais Marinhos - FURG,

4 FaMed -

FURG

Apoio Financeiro:

Resumo

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Introdução Os pinguins de Magalhães são aves marinhas que migram para o Brasil em busca de alimento, durante esta migração tornam-se suscetíveis a adversidades do meio, quando debilitados são encontrados na orla de praias e são recolhidos por instituições especificas que os reabilitam. Em cativeiro esses animais ficam expostos a infecções oportunistas, tais como aspergilose, sendo esta a principal causa de mortalidade de pinguins em reabilitação. A aspergilose é uma doença respiratória, causada por fungos do gênero Aspergillus , a infecção é primariamente aérea, mas existem relatos da dispersão destes fungos na água. Este gênero apresenta crescimento fúngico em uma ampla variação de temperatura, sendo sua taxa de germinação maior a 37°C do que a temperatura ambiente. Objetivos Este trabalho tem como objetivo analisar a influência da temperatura de incubação no isolamento de fungos filamentosos, com ênfase em Aspergillus spp. , de amostras de água onde pinguins são mantidos durante reabilitação. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Durante um período de três meses, foram coletadas amostras semanais de 1l de água do tanque onde os pinguins permanecem para reabilitação no Centro de Reabilitação de Animais Marinhos (CRAM-FURG). O processamento das amostras foi realizado em duplicata pela técnica de membrana filtrante, utilizando alíquotas de 250 ml e filtro de 0,45 µm. Após a filtração a membrana utilizada em cada alíquota, foi dividida em dois fragmentos semelhantes, sendo cada fragmento subdividido em seis. Estes foram depositados sobre placas de Petri contendo ágar Sabouraud dextrose acrescido de cloranfenicol para isolamento fúngico e incubados por uma semana a 25°C e a 37°C. Após o período de incubação foi realizada a contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) de fungos filamentosos isoladas e o gênero Aspergillus spp. foi identificado a partir de características micro e macromorfológicas. Resultados Neste trabalho foram incluídas 12 coletas, das quais 75% (n=09) foram positivas para o isolamento de Aspergillus spp. A temperatura de incubação influenciou a quantidade de UFC de fungos filamentosos isolados, sendo que nas amostras incubadas a 25°C a média foi de 7,5 UFC/placa e nas amostras incubadas a 37°C a média foi 2,6 UFC/placa. Fungos do gênero Aspergillus foram isolados em nove amostras incubadas a 25°C, e em onze a 37°C. Em adição, na temperatura mais elevada as colônias possuíam um diâmetro maior do que quando incubadas a 25°C. As espécies isoladas foram Aspergillus niger , Aspergillus fumigatus e Aspergillus flavus isoladas de 11,6 e 5 amostras respectivamente. A espécie Aspergillus flavus só foi isolada de amostras incubadas a 37°C. Conclusão A temperatura de 25°C permite o crescimento de diversos fungos dificultando o isolamento e a identificação de Aspergillus , já a temperatura de 37°C as espécies de Aspergillus spp. apresentaram um melhor crescimento, pois estas não são inibidas por altas temperaturas.

Palavras-chaves: Agua, Aspergillus , Isolamento, Pinguins-de Magalhães, Reabilitação

Resumo: 01.005

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Efeito do envelhecimento sobre a estrutura e a composição da cartilagem aritenóide de Rã-touro ( Lithobates catesbeianus ).

Autores

1LAUREANO, P. E. D. S.

1, OLIVEIRA, K. D. D.

2, ARO, A. A.

2, GOMES, L.

1, ESQUISATTO, M.

A. M. 1 Programa de Pós-graduação em Ciências Biomédicas - UNIARARAS,

2 Departamento de

Biologia Estrutural e Funcional - UNICAMP

Apoio Financeiro: Fundação Hermínio Ometto

Resumo Introdução Os condrócitos e a matriz extracelular (MEC) da cartilagem hialina de mamíferos apresentam alterações com a idade. Porém, pouco se sabe sobre as mudanças desse tecido em anfíbios com o envelhecimento. Objetivos O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da idade sobre a organização estrutural e a composição da MEC da cartilagem aritenóide, presente na laringe, em machos da espécie Lithobates catesbeianus . Código de Experimentação Animal 081/2005 Código de Experimentação Humana Métodos Animais com 7, 180 e 1080 dias (n=10/idade) foram sacrificados e a cartilagem removida e processada para análise estrutural (n=5) e bioquímica (n=5). Cortes histológicos foram tratados pelas técnicas de Picrosirius para análise das fibras colágenas; Azul de Toluidina, para detecção da basofilia; Von Kossa para detecção de calcificação; Imunohistoquímica (DAB-peroxidase) para colágenos do tipo I e II. Outras amostras foram processadas para análise ultraestrutural e citoquímica para proteoglicanos (PGs), utilizando Azul de Cuprolínico, e documentadas em Microscópio Eletrônico de Transmissão. Os preparados histológicos foram utilizados para quantificação da área (%) da MEC contendo fibras colágenas birrefringentes e contagem de condrócitos (n. em 10000um2). Por meio de eletromicrografias, foi aferido o número de marcações positivas para PGs (n/25um2). A morfometria foi realizada utilizando o programa Sigma Scan PRO 6.0™. Para quantificação (mg/g de tecido) e análise dos glicosanimoglicanos (GAGs), fragmentos do tecido de cada idade foram digeridos e submetidos ao método do DMMB, analisadas por eletroforese e comparados com o padrão. Outros fragmentos foram utilizados para quantificação de hidroxiprolina (HO-Pro) pelo método de Cloramina T. Os dados quantitativos foram analisados pelo teste de ANOVA e pós-teste de Tukey (p <0,05). Resultados Aos 7 dias, a basofilia está amplamente distribuída pela matriz pericelular e territorial. Com a idade, ela vai diminuindo na matriz territorial e, aos 1080 dias, é detectada apenas na matriz pericelular e em algumas regiões da matriz territorial, próximas ao pericôndrio. As fibras colágenas estão distribuídas perpendicularmente ao eixo maior da placa cartilaginosa. As fibras se apresentam mais espessas nos indivíduos mais idosos. Poucas áreas de calcificação na periferia das peças cartilaginosas foram observadas nos animais com 1080 dias. O número de condrócitos diminuiu com a idade. Foram detectados 141,5±22,4 (7 dias), 89,4±14,8 (180 dias) e 45,7±14,8 (1080 dias). A porcentagem da área ocupada fibras colágenas birrefringentes aumentou com a idade. Foram observadas 22,4±8,4 (7 dias), 26,9±5,9 (180 dias) e 57,4±9,2 (1080 dias). O colágeno do tipo I foi detectado apenas no pericôndrio. O colágeno do tipo II foi observado em todo o estroma nas diferentes idades. O citoplasma dos condrócitos apresentou redução, com a idade, na quantidade de retículo endoplasmático rugoso. A marcação para PGs aumentou significativamente entre 7 (18,2±4,1) e 180 (37,8±6,3) dias e reduziu aos 1080 (22,4±3,7) dias. O principal GAG foi o condroitin-sulfato e sua quantidade aumentou entre 7 (31,8±5,7) e

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180 (44,3±4,8) e diminuiu aos 1080 (34,2±3,6) dias. O conteúdo de HO-Pro aumentou entre 7 (64,6±7,2), 180 (88,3±9,2) e 1080 (116,3±10,2) dias. Conclusão Os dados mostram que cartilagem hialina em anfíbios apresenta alterações organizacionais com o envelhecimento e, ao mesmo tempo, parece apresentar um padrão semelhante ao observado em mamíferos nos períodos de vida equivalentes.

Palavras-chaves: Envelhecimento, cartilagem, matriz extracelular, anfíbios

Resumo: 01.006

SUPRESSORS OF GLUTATHIONE AND CATALASE REVEAL AN EXCEPTIONAL RESISTANCE TO OXIDATIVE STRESS IN AN ANOXIA-TOLERANT MODEL

Autores 1,2

SABINO, M. A. C. T. 1, MACHADO, L. P. B.

2, LIMA, M. H.

1, WELKER, A. F.

1 Campus

Ceilândia – UnB - UnB, 2 Departamento de Biologia Celular, UnB, Brasília/DF - UnB

Apoio Financeiro: INCT-Redoxoma, CNPq and FINATEC

Resumo Introdução The reactive oxygen species (ROS) are molecules involved in the control of cell signaling, but their overproduction in cells could be dangerous, disrupting the redox cell homeostasis, a process known as oxidative stress (OS). Nevertheless, enzymes and low weight molecules are involved in the fine control of ROS (mainly H 2 O 2 ), specially the glutathione (GSH) and catalase. OS can be also induced by decreasing some antioxidant elements, as seen in insects, fish, and rat. However, some organisms are able to tolerate and adjust to OS, as the land snail Helix aspersa . In this species, the inhibition of GSH biosynthesis or catalase activity did not affect the OS markers (e.g. lipid peroxidation and carbonyl protein), but the effects of a concomitant inhibition of two components (GSH and catalase) still unknown. Objetivos To assess the response of antioxidants and oxidative stress markers (lipid peroxidation and carbonyl protein) of H. aspersa to concomitant inhibition of GSH biosynthesis and catalase activity. Código de Experimentação Animal 55989-2011 Código de Experimentação Humana Métodos There were three experimental groups of H. aspersa : (i) animals without injection (control) (n = 7); (ii) animals injected with saline solution (NaCl 0.9%) (n = 9); and (iii) animals injected with L-buthionine sulfoximine (BSO), inhibitor of glutathione

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(GSH) biosynthesis, and 3-amino-1,2,4-triazol (ATZ), inhibitor of catalase activity (ATZ plus BSO group) (n = 10). The ATZ plus BSO animals were administrated twice with BSO (1 g/kg) in the hemocele. The second injection was made after 48 hours, and was followed by injection of ATZ (1 g/kg). The animals were sacrificed 48 hours after the last injection, and the foot muscle and hepatopancreas were collected for analysis. The saline group was injected in the same conditions of the ATZ plus BSO group. Analysis: ATZ levels, glutathione equivalents (GSH-Eq), GSH, oxidized GSH (GSSG); activities of antioxidants: catalase, glutathione reductase (GR) and glutathione S-transferase (GST); markers of OS: levels of TBARS, carbonyl protein and GSSG/GSH-Eq ratio. One-way ANOVA and Test t of student were performed to compare groups. Resultados Muscle GSH-Eq and GSH levels in ATZ plus BSO treated animals were lower than control (48% and 58%, respectively) (p < 0.05), but they did not reach statistical significance in relation to saline group (41% and 54%, respectively) (p = 0.058 and p = 0.056, respectively). The levels of GSH-Eq and GSH in hepatopancreas were not different among groups. Muscle and hepatopancreas ATZ levels were higher in ATZ plus BSO group in relation to either control or saline group (p < 0.05). Catalase activity was lower in ATZ plus BSO group in relation to either control or saline group (p < 0.05). There was no difference among groups (p > 0.05) in GSSG levels, GSSG/GSH-Eq ratio, and other antioxidant enzymes activities, OS markers (p > 0.05). Conclusão The absence of changes in the levels of oxidative damage, redox imbalance and antioxidants (except GSH and catalase) was unexpected, since ATZ or BSO alone are sufficient to cause significant alterations in several other animals. It is known that the application of ATZ and BSO and the consequent suppression of GSH and catalase increase the levels of H 2 O 2 ; therefore, some signals of oxidative stress were expected. These results reveal an exceptional resistance by H. aspersa to oxidative stress.

Palavras-chaves: Antioxidant, Hydrogen peroxide, Oxygen, Metabolism, Peroxidase

Resumo: 01.007

LOCALIZAÇÃO, DISTRIBUIÇÃO E ORIENTAÇÃO DOS QUIMIORRECEPTORES DE O2 BRANQUIAIS DE UM TELEÓSTEO DE RESPIRAÇÃO AÉREA, O BAGRE-AFRICANO,Clarias gariepinus.

Autores 1BELÃO, T. C.

1, KALININ, A. L.

1, RANTIN, F. T.

1 Ciências Fisiológicas - UFSCar

Apoio Financeiro: FAPESP

Resumo Introdução Animais de respiração aquática são mais frequentemente submetidos à reduções do O 2 ambiental. O bagre-africano possui um órgão de respiração aérea que o torna capaz de sobreviver durante longas hipóxias ambientais. Suas respostas fisiológicas dependem da localização, distribuição e orientação dos quimiorreceptores de O2 distribuídos nas branquiais. Objetivos Estudar as respostas do controle dos quimiorreceptores de O 2 de C. gariepinus , grupo intacto (GC) e experimental (GD –

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grupo com oblação dos 1os pares de arcos branquiais), sobre os parâmetros cardiorrespiratórios em resposta à hipóxia e às injeções internas e externas controle e de NaCN. Código de Experimentação Animal 035/2010 Código de Experimentação Humana Métodos Os GC e GD foram submetidos à hipóxia gradual (de 140 à 100, 70, 50, 30 mmHg) sem acesso ao ar atmosférico e as respostas cardiorrespiratórias analisadas foram: taxa metabólica - VO2; frequência respiratória - f R ; ventilação branquial - V G ; volume ventilatório - V T ; extração de O 2 da corrente ventilatória - EO2; frequência cardíaca - f H ). Após isto, os GC e GD foram submetidos à hipóxia (140, 100, 70, 50, 30, 20, 10 mmHg) com acesso ao ar atmosférico e as respostas cardiorrespiratórias analisadas foram: f R , f H e frequência de respiração aérea – f RA . Resultados O GC manteve a VO2 constante até a PcO2 (~ 55 mmHg), enquanto que o GD apresentou maior PcO2 (71 mmHg).; após tais valores a VO2 decresceu progressivamente. A diminuição da VO2 foi acompanhada da diminuição significativa da EO2, no GC, a qual diminuiu cerca de 40% do valor basal de normóxia, enquanto no GD a EO2 aumentou devido a diminuição da V T . Já o GC apresentou um contínuo aumento do V G , V T e f R até o fim do experimento de hipóxia gradual. No grupo GC, a f H diminui progressivamente de 43,4 bpm até 19,2 bpm em hipóxia severa, enquanto que não houve alteração do GD, identificando que os 1os pares de arcos brânquias são responsáveis pelo controle da f H durante a hipóxia sem acesso ao ar. Experimentos em hipóxia gradual e com acesso ao ar mostraram que C. gariepinus aumentou aproximadamente 5x a f RA no GD. Ainda, em cada PwO2 ocorreu uma bradicardia pré-RA seguido de taquicardia significativa pós-RA (típico de um respirador aéreo); enquanto que a f R manteve-se constante até à hipóxia mais severa. Injeções externas de NaCN, simulando hipóxia, demonstraram a existência de quimiorreceptores de O 2 externos que fazem o bagre-africano responder primeiramente às alterações da f H durante hipóxia, enquanto injeções de NaCN demonstraram respostas secundárias à hipoxemia relacionadas às alterações nos parâmetros respiratórios de f R e f RA

mediados por quimiorreceptores de O2 internos. Conclusão Os 1os pares de arcos branquiais possuem quimiorreceptores de O2 responsáveis para modular respostas cardiorrespiratórias voltadas tanto para o ambiente externo (hipóxia) quanto para o ambiente interno (hipoxemia), sendo que responde primeiramente à hipóxia com uma bradicardia acentuada e, secundariamente, à hipoxemia com um aumento da f R e principalmente da f RA .

Palavras-chaves: hipóxia, quimiorreceptores de O2, respiração aérea, teleósteo

Resumo: 01.008

ANTIOXIDANT DEFENSES DURING INSECT METAMORPHOSIS – CATALASE AND GLUTATHIONE S-TRANSFERASE ACTIVITIES DURING THE PUPAL-ADULT TRANSITION

Autores 1MOREIRA, D. C.

2, SABINO, M. A. C. T.

1, ABDON, J. A. S.

1, HERMES-LIMA, M.

1

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Departamento de Biologia Celular - UnB, 2 Faculdade da Ceilândia - UnB

Apoio Financeiro: CNPq and INCT – Processos Redox em Biomedicina.

Resumo Introdução In holometabolous insects the transition from egg to adult (metamorphosis) is the result of drastic structural changes. One could expect that metabolic rate should be increased during metamorphosis due to the extent of morphological and physiological changes. However, studies regarding several insect orders (Diptera, Lepidoptera, Coleoptera, and Hymenoptera) have reported that metabolic rate decreases just after pupation and increases exponentially shortly before adult eclosion (i.e. a U-shaped curve). It is known that the endogenous production of reactive oxygen species (ROS) is associated with metabolic rate. Thus, this rapid metabolic rate transition during metamorphosis would demand adjustments of the animals’ antioxidant defenses to manage ROS levels. Objetivos Our aim is to assess the adjustments (if any) of the antioxidant system during insect metamorphosis. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Eggs of the sunflower caterpillar, Chlosyne lacinia , were collected in Cerrado areas (15°43’S, 47°53’W) and maintained at 25°C and 12:12 light:dark cycle. After egg hatching, larvae were fed daily with fresh leaves of Tithonia diversifolia . Animals were kept under these conditions until sampled for analysis at different developmental stages. Wandering larvae (WD); pupae at days 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 after pupation; and newly-eclosed adults (AD) were frozen in liquid nitrogen and stored at -80°C until assayed. Whole body samples were homogenized and used to measure the activity of citrate synthase (CS; EC 2.3.3.1), glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PD; EC 1.1.1.49), catalase (CAT; EC 1.11.1.6) and glutathione S-tranferase (GST; 2.5.1.18). All groups (n=5 each) were compared by one-way ANOVA and Tukey's multiple comparison test, employing a critical p value of 0.05. Resultados As previously observed for other species the activity of CS exponentially increases shortly before adult eclosion. CS activity doubles from day 4 to day 5 pupae, and increases by 3.4-fold from day 5 pupa to the adult. Similarly, adult G6PD activity increases by 2.3-fold when compared to day 5 pupa. On the other hand, the activities of CAT and GST present a decreasing trend throughout metamorphosis, decreasing by 52% and 60% respectively when comparing adults to larvae. Conclusão Although the endogenous sources of ROS formation (i.e. mitochondria) increases towards the adult form (as determined in other insects), the antioxidant defenses CAT and GST decreases. This indicates that the demand to deal with dietary oxidants during the larval stage prevails over the demand to control mitochondrial-derived ROS. The elevated G6PD activity represents a higher potential to generate NADPH. Elevated NADPH levels could be used in biosynthetic pathways for adult formation. In the antioxidant context, NADPH can be employed to regenerate oxidized glutathione. Further assays, including the activity of superoxide dismutase and the levels of glutathione, will clarify the antioxidant regulation during insect metamorphosis.

Palavras-chaves: Oxidative Stress, Reactive Oxygen Species, Antioxidants, Lepidoptera, Metamorphosis

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Resumo: 01.009

Watch N’Ask: premiando as melhores perguntas em bioquímica clínica

Autores

1CALDAS, N. G.

1, CUBAS, E.

1, PEREIRA, G. C.

2, MACHADO, V. H. S.

1, LIMA, M. H.

1

Faculdade de Medicina - UnB, 2 Departamento de Nutrição - UnB,

3 Departamento de Biologia Celular

- UnB

Apoio Financeiro: CNPq

Resumo Introdução A busca de ferramentas adequadas para a melhor dinâmica em ensino-aprendizagem é parte fundamental da atividade docente. Há mais de 10 anos temos aplicado propostas de inovações em métodos de aprendizado ativo ( “active learning” ) direcionados para os cursos de medicina e nutrição da UnB (Sé et al. Adv Physiol Educ 32, 38-46, 2008). Por exemplo, exploramos recentemente o potencial do uso de blogs de bioquímica clínica e aplicada (BCA) produzidos por nossos alunos. A atual metodologia, denominada Watch N’Ask , foi criada em 2011 (a ideia partiu da monitora Camila Mariano) e envolve uma dinâmica de perguntas e respostas, com a premiação das melhores perguntas. A grande novidade dessa abordagem é a valorização das perguntas ao invés das respostas. Ao final das apresentações dos seminários discentes de BCA, eram dados 5 minutos para três grupos previamente formados elaborar uma pergunta sobre o tema apresentado. Essas perguntas eram disponibilizadas na internet, sendo oferecido 5 dias para o grupo alvo responder. Até 30 perguntas eram produzidas por semestre, e as respostas eram disponibilizadas nos blogs de BCA dos estudantes. Ao fim do semestre os monitores decidiam a melhor pergunta, atribuindo ao grupo 0,3 pontos na média. Objetivos Avaliar o perfil de aceitação dos alunos quanto à nova ferramenta proposta; a geração de aprendizado em BCA e o possível aumento do interesse em bioquímica. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos A aceitação dos alunos foi avaliada por meio de questionário com seis afirmações utilizando-se uma escala Likert de 6 pontos (1 significa “discordo totalmente” e 6 significa “concordo totalmente”). O questionário era sobre (i) experiência de elaborar as perguntas e respostas, (ii) se essa nova ferramenta havia aumentado o interesse na disciplina e o aprendizado e (iii) sobre a qualidade do conteúdo das perguntas feitas pelos alunos. Foram avaliadas quatro turmas semestrais (2011-1 a 2012-2), com um total de 256 alunos avaliados. Os questionários deixados em branco não foram considerados na análise dos dados. Este estudo (projeto 039/2012) foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da FM-UnB. Resultados

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Dos 256 questionários, 245 foram completamente preenchidos. A análise geral das seis afirmativas indicou um bom padrão de aceitação por parte dos alunos, com a maioria das afirmativas apresentando moda 4 ou 5 (em um caso foi 6). Das afirmativas, somente duas apresentaram um padrão de respostas refletindo aceitação moderada (modas 3-4 e 4), sendo a afirmativa “A participação na experiência Watch N’Ask aumentou o meu interesse não só pela disciplina, mas também pelo seu conteúdo” um exemplo. De forma geral o perfil de resposta de cada uma das 4 turmas foi semelhante nas seis afirmativas. Conclusão Os resultados obtidos ao longo de 4 semestres demonstram boa aceitação da nova metodologia. A valorização das perguntas sobre BCA é a novidade que proporcionou aos alunos um efeito positivo moderado quanto ao aprendizado, sugerindo que o aprimoramento dessa técnica poderia elevar o interesse dos alunos na disciplina, assim como o aprendizado. De qualquer forma, o Watch N’Ask se mostrou útil e pode ser empregado em qualquer outra disciplina da área de saúde.

Palavras-chaves: blogs, bioquímica, questionários

Resumo: 01.010

ENDO TRUNFO : Uma abordagem lúdica e criativa no ensino dos hormônios

Autores 1ROSSINI, K. F.

1, BATISTA, L. V.

1, AMARAL, M. E. C.

1 NUCISA - FHO/UNIARARAS

Apoio Financeiro:

Resumo Introdução A criatividade é um fenômeno complexo, que se manifesta em diferentes níveis e nos mais diversos campos da atividade humana. No que diz respeito à criatividade no trabalho pedagógico, esta é considerada como formas de se ensinar, de se educar, com algum tipo de novidade e que resulte em algo valioso para a aprendizagem e para o desenvolvimento dos alunos (MARTÍNEZ, pp. 69- 94, 2006). O jogo pedagógico ou didático é aquele fabricado com o objetivo de proporcionar determinadas aprendizagens, diferenciando-se do material pedagógico, por conter o aspecto lúdico (CUNHA, 1988). É utilizado como uma alternativa para se melhorar o desempenho dos estudantes em alguns conteúdos de difícil aprendizagem (GOMES et al, p.389-92, 2001). O estudo de hormônios humanos - substâncias químicas que são secretadas para os líquidos corporais por uma célula ou por um grupo de células, que exerce efeito de controle fisiológico sobre outras células do organismo- ainda é considerado um desafio, tanto para alunos quanto para educadores, no que diz respeito à memorização das diversas categorias de hormônios, suas funções, quantidade de glândulas excretoras, local de atuação e valores de referência. Em face desse contexto, foi possível a aplicação de uma alternativa diferenciada, ou seja, a adaptação do conteúdo em um jogo pedagógico, destacando os aspectos imprescindíveis do conhecimento de cada hormônio. Sendo assim, dentre os mais diversificados jogos existentes, o modelo Top Trumps se destaca por conseguir abordar de forma objetiva os aspectos prioritários de um tema, além de ter alta aceitação se apresentar em forma de cartas. O Top Trumps consiste em um jogo de 32 cartas colecionáveis divididas em oito grupos de quatro cartas, sendo uma delas a Top Trump. Tem como objetivo a tomada de todas as cartas em jogo por meio de escolhas de características de cada carta, como por exemplo, velocidade, altura e longevidade. Dependendo do tema abordado pelo Trumps, as características são alteradas o que facilita a adaptação do conteúdo educativo sobre hormônios para o jogo.

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Objetivos Elaborar um jogo didático, a partir de um modelo existente, conhecido por Top Trumps, que auxilie nos processos de ensino e aprendizagem do conteúdo de hormônios humanos. Foram selecionados 32 hormônios e os seguintes dados: massa molar, meia vida, quantidade de tecidos liberadores, valores de referência masculino e feminino e função para confecção das cartas. Avaliar a funcionalidade e aceitação pelos alunos do Centro Universitário Hermínio Ometto – FHO. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos O projeto foi inscrito no comitê de Ética e Pesquisa sob o número 788/2012. O trabalho foi realizado através da pesquisa de dados como Medline, Scielo, livros de Fisiologia Humana e também em literaturas específicas sobre o Top Trumps. Foram selecionados livros e periódicos que faziam um estudo interdisciplinar de jogos didáticos. Após a pesquisa de dados, foram realizadas as conversões das unidades dos tópicos peso molecular e valor de referência. Para a padronização das cartas optou-se pela unidade g/Mol para o peso molecular e nanograma (ng) para o valor de referência. Resultados Por aliar os aspectos lúdicos ao conteúdo ministrado em aulas, o jogo auxilia no ensino, aprendizagem e memorização de conceitos complexos, favorecendo o raciocínio, a interação entre alunos e entre professores e alunos, diminuindo as dúvidas que envolvem os aspectos importantes da temática. Conclusão O estudo do jogo didático como este, permitiu que o objetivo fosse atingido, resultando em um aprendizado facilitado e significativo sobre hormônios do ser humano.

Palavras-chaves: hormônios, trunfo, metodologia ativa, ensino, aprendizado