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Page 1: AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE E DA ATIVIDADE … · do espaço do canal radicular, a extrusão não intencional através da constrição apical pode ocorrer, causando irritação,

PROPEP 2014

AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE E DA ATIVIDADE GELATINOLÍTICA DE

UM NOVO CIMENTO ENDODÔNTICO A BASE DE SILICONE

Aluno: RODRIGO DE MENEZES VALENTIM Colaboradores: ALINE A NEVES, GUSTAVO DE-DEUS, THAIS ACCORSI-MENDONÇA Orientador: EMMANUEL JOÃO NOGUEIRA LEAL DA SILVA Curso / Instituição de Ensino Superior: ODONTOLOGIA/UNIGRANRIO

Introdução / Objetivos / Material e Métodos / Conclusões / Resultados / Referências Bibliográficas

Introdução

Os cimentos endodônticos são amplamente utilizados em procedimentos endodônticos e embora deva ser contido dentro

do espaço do canal radicular, a extrusão não intencional através da constrição apical pode ocorrer, causando irritação,

inflamação e possível atraso na cicatrização de feridas após procedimentos endodônticos. Para superar os efeitos

citotóxicos dos cimentos endodônticos tradicionais, cimentos à base de silicone foram recentemente introduzidos; o

material de obturação do canal radicular à base de dimetil polissiloxano (GuttaFlow 2) é um exemplo deste grupo de

materiais.

Objetivos

O objetivo do presente estudo foi o de comparar a citotoxicidade, atividade gelatinolítica e os níveis de proteína (MMP-

2 e MMP-9), produzidos por células fibroblásticas 3T3 após estimulação com GuttaFlow 2. O cimento endodtôntico

AH Plus foi utilizado como um material de referência.

Material e Métodos

1.Amostras:Sob condições assépticas, os cimentos GuttaFlow®2 e AH Plus, descritos na Tabela 01, foram manipulados

e inseridos em anéis de Teflon. Após 4h as amostras de contato com o meio DMEM foram removidas e colocadas em

meio livre de soro FBS.2. Ensaio Celular: Os fibroblastos imortalizados (linhagem 3T3) foram cultivados em DMEM

suplementado com 10%de soro fetal bovino (FBS) a 37°C em uma incubadora contendo 5% de CO2. Para o ensaio

experimental, as células foram deixadas até atingir 80% de confluência. As células foram cultivadas durante 24h, e

depois disso, o meio de cultura foi substituído por novo DMEM sem soro. A viabilidade celular foi determinada através

de ensaios de MTT e LDH.3. Atividade proteica: As atividades de MMP-2 e MMP-9 dos sobrenadantes foram medidas

por um ensaio zimográfico padrão. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando –se o software Primer 1.4.

Como evidenciado na Figura 01 A e B, acitotoxicidade de AH Plus e GuttaFlow2 eluídos foi avaliada utilizando o

ensaio de MTT e LDH. AH Plus mostrou menor viabilidade celular que GuttaFlow2 (p<0,01). Além disso, GuttaFlow2

foi não-citotóxico.GuttaFlow2 pareceu não afetar os níveis de MMP-2, enquanto que AH Plus havia elevado atividade

gelatinolítica de MMP-2 como confirmados por medições quantitativas (Figura 01C). Nenhuma atividade gelatinolítica

detectável de MMP-9 (92 kDa) foi observada em quaisquer dos grupos testes. Os níveis de proteína MMP-2 foram mais

elevados no grupo AH Plus quando comparado com o grupo controle e grupo GuttaFlow 2 (figura 1D).

Conclusões

Os resultados do presente estudo confirmam o potencial biocompatibilidade ideal do novoendodôntico GuttaFlow 2.

Estudos futuros devem avaliar outras propriedades deste cimento endodôntico.

Referências Bibliográficas

1. Ricucci D, Langeland K. Apical limit of root canal instrumentation and obturation part 2. A histological study. Int

Endod J 1998;31:394-409.

2. Huang F, Yang S, Chang Y. Up-regulation of gelatinases and tissue type plasminogen activator by root canal sealers

in human osteoblastic cells. J Endod 2008;34:291-4.

3. Silva EJ, Accorsi-Mendonça T, Almeida JF, Ferraz CC, Gomes BP, Zaia AA. Evaluation of cytotoxicity and up-

regulation of gelatinases in human fibroblast cells by four root canal sealers. IntEndod J 2012;45:49-56.

Bolsa de Iniciação Científica (IC):

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