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ISSN 0103-4235Alim. Nutr., Araraquarav.18, n.3, p. 267-275, jul./set. 2007

ATIVIDADE ANTIOXIDANTE E ANTIFNGICA DE EXTRATOS VEGETAIS*

Melissa dos Santos OLIVEIRA**Giniani Carla DORS**

Leonor Almeida de SOUZA-SOARES***Eliana BADIALE-FURLONG***

*Trabalho elaborado com apoio fi nanceiro da FAPERGS e do CNPq.**Curso de Ps-Graduao Engenharia e Cincia de Alimentos Fundao Universidade Federal do Rio Grande FURG Laboratrio de Micotoxinas 96201-900 Rio Grande- RS Brasil.***Departamento de Qumica Fundao Universidade Federal do Rio Grande FURG Laboratrio de Micotoxinas 96201-900 Rio Grande- RS Brasil.

RESUMO: A proposta desta investigao foi medir os contedos fenlicos totais, avaliar a atividade antioxidan-te, e a atividade antifngica de extratos de laranja, limo, ma, banana, batata, berinjela, arroz e trigo. Os contedos de fenis totais dos extratos foram quantifi cados por mtodo espectrofotomtrico, utilizando o reagente folin-ciocalteau e testados quanto a atividade antioxidante em um sistema enzimtico na reduo da atividade da peroxidase. Foi avaliada a atividade antifngica sobre o fungo Aspergillus fl avus, sendo sua produo de afl atoxina B1 avaliada em placas de petri com BDA. os valores de velocidade mxima das reaes enzimticas indicaram que os extratos vegetais estudados promoveram inibies de 22% a 98% na reao de escurecimento enzimtico em 10 minutos. O comporta-mento das velocidades das reaes de escurecimento em diferentes concentraes de substrato sugere que as reaes de inibio so do tipo no competitiva, exceto para os ex-tratos das cascas de banana, berinjela e polpa de ma. Os extratos das polpas de limo, laranja e banana e das cascas de ma apresentaram atividade antioxidante maior que a atividade antifngica sobre Aspergillus fl avus. Todos os ex-tratos vegetais, excetuando-se a polpa da batata, inibiram totalmente a produo de afl atoxinas.

PALAVRAS-CHAVES: Atividade antioxidante; compos-tos fenlicos; atividade antifngica; micotoxinas; peroxi-dase.

INTRODUO

Os antioxidantes podem ser defi nidos como subs-tncias que em pequenas concentraes, em comparao ao substrato oxidvel, retardam ou previnem signifi cativa-mente o incio ou a propagao da cadeia de reaes de oxidao. Estes compostos inibem no s a peroxidao dos lipdios, mas tambm, a oxidao de outras molculas, como protenas, DNA, entre outras.8

Compostos qumicos que possuem atividade antioxi-dante geralmente so aromticos e contm pelo menos uma hidroxila podendo ser sintticos como o butil hidroxianisol (BHA) e o butil hidroxitolueno (BHT), largamente utiliza-dos pela indstria de alimentos. Os naturais, denominados substncias bioativas, incluem organosulfurados, os fen-licos (tocoferis, fl avonides e cidos fenlicos), os terpe-nos, carotenides e o cido ascrbico que fazem parte da constituio de diversos alimentos.19,30

Diversos autores vm mencionando que os vegetais da dieta so fonte de antioxidantes fenlicos.12,16,30,31,35,36 As frutas, hortalias, gros e especiarias, alm de plantas me-dicinais so as principais fontes de compostos antioxidan-tes mostradas pela literatura.1,2,20,24,31,32 As pesquisas buscam substncias com atividade antioxidante, provenientes de fontes naturais, que possam atuar sozinhas ou sinergica-mente com outros aditivos; que funcionem como alterna-tiva para prevenir a deteriorao oxidativa de alimentos e limitem o uso dos antioxidantes sintticos e agentes con-servadores.19

Alm disso, vem sendo demonstrado que estes com-postos podem atuar como antifngicos e inibidores da pro-duo de micotoxinas, tais como a afl atoxina, por atuarem na regulao da peroxidao lipdica, inibindo a formao de perxidos e conseqente estresse oxidativo que est re-lacionado a biosntese de afl atoxinas.10,11,23,28,29

Evidncias cientfi cas permitem afi rmar que a pro-priedade antioxidante de vegetais se deve, principalmente, a seus compostos fenlicos.3,12 Kaur & Kapoor14 encontraram uma correlao signifi cativa e positiva (r2 = 0,66, p < 0,05) entre a atividade antioxidante e contedo de fenis totais em vegetais da dieta asitica.

Diferentes propostas vm sendo realizadas para ava-liar a atividade antioxidante de compostos fenlicos, mas pouco tem sido feito para determinar o efeito inibidor de compostos fenlicos dos mesmos em sistemas enzimticos, particularmente com respeito peroxidase. Esta uma en-zima que aparece em clulas de diferentes seres vivos e

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que tem por funo oxidar compostos doadores de eltrons, tendo como agente doador de oxignio a gua oxigenada. Bioquimicamente a funo desta enzima proteger as c-lulas possveis danos, e sua atividade se manifesta, princi-palmente, em situaes de desequilbrios fsico-qumicos do sistema. O excesso da ao desta enzima pode resultar em danos indesejveis nas clulas. No caso dos alimentos, as principais alteraes so perdas do fl avor, da cor e dos nutrientes. A atuao da peroxidase sobre compostos doa-dores de eltrons a torna atrativa para se estimar a atividade antioxidante de diferentes compostos, como por exemplo, os fenis. No trabalho de Hemeda e Klein9 foi demonstrada a atividade antioxidante de -tocoferol, quercetina, cidos rutnico e clorognico sobre a atividade da peroxidase ex-trada de diferentes vegetais. Colla et al5 testaram a ativida-de antioxidante de extrato fenlicos de Spirulina platensis usando peroxidase extrada de batata.

Estas consideraes e a solubilidade, em sistemas aquosos, dos compostos fenlicos norteou o propsito des-te trabalho que abrangeu quantifi car o contedo de fenli-cos totais, avaliar o efeito antioxidante sobre a atividade da peroxidase, verifi car o efeito inibidor sobre o desenvolvi-mento do fungo toxignico Aspergillus fl avus e a respectiva produo de Afl atoxina B1 de extratos vegetais das pores comestveis e das cascas de frutas, tubrculos e cereais.

MATERIAL E MTODOS

Preparo dos Extratos Fenlicos

Os vegetais estudados neste trabalho foram laranja (Citrus sinensis, Osbeck), limo (Citrus limon), ma gala (Malus domestica Borkh), banana prata (Musa spp.), batata inglesa rosa (Solanum tuberosum L.), berinjela (Sonalum melongina, L.), arroz benefi ciado (Oryza sativa) e trigo in-tegral (Triticum aestivum) adquiridos no comrcio da cida-de de Rio Grande, RS. As casca das frutas e do tubrculo foram separadas de suas pores comestveis (polpas), sen-do ambos cortados em cubos de 5mm de aresta. Os gros descascados foram modos em moinho de facas at 0,35 mm de granulometria.

A extrao dos compostos fenlicos foi realizada a frio com lcool metlico na proporo de 1:5 (massa seca:solvente) em agitadores horizontais, seguida da partio com hexano e clarifi cao com hidrxido de brio 0,1M e sulfato de zinco 5%. O contedo de fenis totais foi quan-tifi cado atravs do mtodo espectrofotomtrico utilizando o reagente de Folin-Ciocalteau, empregando-se uma cur-va padro com diferentes concentraes de tirosina (0 a 5 g.mL-1 ) e os resultados expressos em g de fenis/g de vegetal em base seca.4 Os extratos metanlicos foram concentrados sob presso reduzida a 40C para eliminar o metanol e obter um extrato aquoso.

Teste de Atividade Antioxidante em Sistema Aquoso

A atividade antioxidante dos extratos vegetais estu-dados foi determinada pela inibio da reao de escureci-mento enzimtico do guaiacol catalisada pela peroxidase da batata.

Preparo do Extrato Enzimtico

A enzima peroxidase foi extrada da polpa da batata (20g) com 100mL de soluo tampo fosfato pH 7, sob agi-tao em blender por 2 minutos, seguida de fi ltrao. Uma alquota de 10 mL do sobrenadante foi adicionada a 20 mL de acetona para precipitao da enzima. Aps centrifuga-o, o sobrenadante foi descartado e o resduo protico foi ressuspendido com EDTA 0,25M.

Efeito dos extratos vegetais sobre o escurecimento enzim-tico catalisado por peroxidase.

A reao enzimtica foi realizada a 30C e pH 7,0 utilizando-se o guaiacol como substrato em presena de H2O2 0,08%. Os extratos vegetais foram adicionados como inibidores da reao e no grupo controle o volume de extra-to vegetal foi substitudo por gua destilada. A absorbncia foi medida a 470 nm em um espectrofotmetro VARIAN modelo CARY 100 no tempo zero e aps 5, 10, 15, 20 e 25 minutos de reao. A unidade de atividade enzimtica especfi ca foi defi nida como a absorbncia produzida por miligrama de protena do extrato enzimtico em 1 minuto. A atividade antioxidante foi expressa como o percentual de inibio da reao de escurecimento aps 10 minutos de reao, em relao ao seu controle.

Avaliao do mecanismo de inibio de peroxidase pelos extratos vegetais.

Diferentes concentraes do substrato (guaiacol) fo-ram utilizados na reao enzimtica e os resultados foram plotados segundo o mtodo grfi co de Lineweaver e Burk para se avaliar o comportamento cintico. A reao ocorreu em soluo tampo fosfato pH 7,0, com o extrato enzim-tico da batata, perxido de hidrognio 0,08% e diferentes alquotas de guaiacol 0,5% ( 0, 0,1, 0,3, 0,5, 0,8, 1,0 mL) como substrato da reao. Alm do grupo controle o proce-dimento foi repetido na presena dos extratos vegetais.

Teste de Atividade Antifngica e Antimicotoxignica

Os testes de atividade antifngica contra o Aspergillus fl avus foram realizados in vitro, em placas de Petri conten-do meio Agar Batata Dextrose (BDA). Os extratos vegetais foram adicionados ao meio de cultura, de forma a perfazer as seguintes concentraes de fenis totais: Cascas e polpas de banana: 58 e 40g fenis. mL

-1gar; limo : 370 e 170g fe-

nis. mL-1

gar; laranja: 250 e 170g fenis. mL-1

gar; ma: 200 e 88g fenis. mL

-1gar; berinjela: 60 e 40g fenis. mL

-1gar; batata:

38 e 67g fenis. mL-1

gar; e gro de arroz e trigo: 6 e 9g fenis.

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mL-1gar, respectivamente. No experimento controle gua estril em foi adicionada em substituio aos extratos vege-tais. Aps o preparo das placas de Petri, 5L da suspenso de esporos do fungo Aspergillus fl avus (107esporos.mL-1) foram colocados no centro das placas e estas incubadas a 30C por 7 dias. O dimetro do crescimento do miclio foi medido em centmetros no 3o, 5o e 7o dia de incubao. Os experimentos foram realizados com triplicata.21 Aps 14 dias de incubao as placas foram congeladas para poste-rior determinao da afl atoxina B1 no meio de crescimento. A extrao das micotoxinas seguiu o mtodo adaptado de Tanaka et al.27 e a identifi cao e a quantifi cao foram rea-lizadas em cromatografi a de camada delgada.26

RESULTADOS E DISCUSSES

Os frutos limo, laranja, banana, berinjela, ma, o tubrculo batata e os gros de arroz e de trigo esto, co-mumente presentes na dieta da populao no sul do Rio Grande do Sul e foram coletadas no comrcio, aleatoria-mente, sendo considerados aqueles aspectos subjetivos em-pregados pelos consumidores (cor e fi rmeza, principalmen-te) como aptos para o emprego domstico. A determinao do teor de fenis totais foi realizada nas cascas das frutas e do tubrculo, separadamente da sua poro comestvel, para a estimativa das fontes potenciais de compostos fen-licos, as quais so descartadas diariamente como resduos do emprego destes produtos na dieta cotidiana. A Tabela 1 apresenta os resultados levantados sobre o contedo de compostos fenlicos nos vegetais estudados.

Tabela 1 Teores dos fenis totais nos extratos vegetais.

Porescomestveis

Fenis totais(g fenis.g (bs)

-1)Cascas Fenis totais

(g fenis.g (bs)-1)

p. limo 270057 c. limo 5500160p. laranja 450052 c. laranja 420037p. ma 10002,6 c. ma 4700140

p. banana 3108,5 c. banana 101025p. berinjela 3905,8 c.berinjela 220096

p. batata 41014 c. batata 99038Arroz 401,1Trigo 2909,5

p = polpa; c = casca; mdia desvio padro de triplicata

O arroz foi o material que apresentou menor conte-do de compostos fenlicos (40 gfenis.g(bs)

-1). Os extratos das pores externas dos vegetais apresentam valores entre 2 e 5 vezes superiores aos de suas respectivas polpas, com exceo do extrato de laranja. Tal perfi l era esperado tendo em vista que a funo protetora atribuda a estes compostos seria mais abundante nas pores mais externas.23, 29 Os des-cartes ricos em fenis podem ser interessantes como mat-rias prima para a obteno de antioxidantes naturais, dada a sua abundncia nos resduos domsticos e industriais.

Considerando-se a abundncia dos compostos fe-nlicos nas pores estudadas foi avaliada a atividade an-tioxidante dos extratos em um sistema enzimtico aquoso sobre a ao da peroxidase, que permitiria inferir sobre o mecanismo de inibio de oxidao uma vez que o poten-cial antioxidante de uma substncia depende de sua estru-tura qumica.

A Tabela 2 apresenta a concentrao de compostos fenlicos contida nos extratos utilizados em cada experi-mento, a atividade enzimtica especfi ca e a inibio em porcentagem, causada pela presena dos extratos vegetais no meio de reao. Cabe salientar que no foi observada re-lao linear crescente entre os teores de fenis e a inibio do escurecimento avaliada pela inibio da atividade enzi-mtica especfi ca relativa ao controle (ausncia de extrato). Este efeito indica que os tipos e as estruturas dos compos-tos fenlicos presentes infl uenciam mais na atividade antio-xidante que a concentrao dos fenlicos totais, conforme o que vem sendo preconizado em literatura.

Kahkonen et al.12 estudaram 96 extratos fenlicos de pores comestveis e no comestveis de frutas, vegetais, ervas, cereais, brotos e sementes e encontraram alto conte-do de compostos fenlicos e alta atividade antioxidante, porm, tambm, no encontraram uma correlao signifi -cativa entre o teor de fenis totais e a atividade antioxi-dante determinados nos vegetais. Velioglu et al.30 encon-traram uma correlao signifi cativa de 0,4253 (R2 = 0,4253 p

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As Figuras 1 e 2 ilustram o comportamento da re-ao de escurecimento enzimtico do guaiacol catalisada pela peroxidase em ausncia e presena de extratos das cas-cas e polpas dos vegetais, respectivamente, ao longo de 25 minutos.

Pela Figura 1 pode ser observado que houve dimi-nuio da velocidade de escurecimento ao longo do tempo, ou seja, a reao de escurecimento enzimtico foi inibida em presena dos extratos vegetais destacando os de cas-cas de limo, laranja e ma. Nestes casos as atividades inibitrias coincidem com os maiores teores fenlicos en-contrados.

Wolfe et al.33 verifi caram que as cascas de diferentes variedades de ma apresentaram alto contedo de com-postos fenlicos (300 a 580mg cido glico/ 100g de cas-ca), principalmente fl avonides e antocianinas, a atividade antioxidante e antiproliferao de clulas cancergenas fo-ram mais elevadas que a polpa desta fruta.

Os resultados demonstram que as cascas de batata e banana, tambm, so potenciais fontes de antioxidan-te. Diferentes pesquisadores relataram o alto contedo de compostos fenlicos na casca de batata, destacando o cido clorognico, e a propriedade antioxidante do seu extrato

CONTROLE

C_LIM

C_LAR

C_MA

C_BAN

C_BAT

C_BER

Tempo (min)

AB

S (4

70 n

m)

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

0 5 10 15 20 25

FIGURA 1 Inibio da reao de escurecimento enzimtico pelos extratos das cascas vegetais. CONTROLE = reao sem adio de extrato vegetal; C_LIM = cascas de limo; C_LAR = cascas de laranja; C_MA = cascas de ma; C_BAN = cascas de banana; C_BAT = cascas de batata; C_BER = cascas de berinjela.

CONTROLE

P_LIM

P_LAR

P_MA

P_BAN

P_BAT

ARROZ

TRIGO

Tempo (min)

ABS

(470

nm

)

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

0 5 10 15 20 25

FIGURA 2 Inibio da reao de escurecimento enzimtico pelos extratos das pores comestveis vegetais. CONTROLE = reao sem adio de extrato vegetal; P_LIM = polpas de limo; P_LAR = polpas de laranja; P_MA = polpas de ma; P_BAN = polpas de banana; P_BAT = polpas de batata; ARROZ = extrato de arroz; TRIGO = extrato de trigo.

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com diferentes solventes, inclusive a gua. Estes extratos da casca da batata foram aplicados na conservao de leo de soja e carne de porco irradiada.13, 36, 25

No caso deste trabalho o extrato fenlico de pol-pas de batata (Figura 2) foi o que afetou menos a reao de escurecimento, pois este tecido foi a fonte enzimtica e consequentemente apresentou maior afi nidade do extrato vegetal pelo sistema de seu prprio substrato.

Entre os cereais, os extratos de gro de trigo apre-sentaram menor atividade antioxidante e os efeitos dos ex-tratos de arroz se assemelharam aos extratos de polpas da ma (62%).

Os extratos vegetais das polpas de laranja e de limo continuaram apresentando os maiores potenciais de inibio do processo oxidativo, seguidos pelos extratos da polpa de banana que no o mais rico na concentrao de compostos fenlicos. Gardner et al.7 atribuiram a atividade antioxidan-te das polpas de limo e de laranja ao seu contedo de cido ascrbico, mas neste caso considerando o tipo de extrao realizada para obteno de fenis difi cilmente proporciona-ria o efeito do cido ascrbico no resultado observado. Cor-roboram com esta observao os resultados de Lu & Foo17 que demonstraram que os polifenis como a epicatequina, o cido clorognico e a quercetina-3-glicosdio extrados de ma apresentaram forte atividade antioxidante de 2 a 3 vezes superior as das vitaminas C e E.

Embora estejam disponveis diferentes estudos que demonstram a atividade antioxidante de compostos fenli-cos de diversas fontes nem sempre os mecanismos para esta atividade so esclarecidos.18, 34

Neste trabalho foi empregada a relao de Michae-lis-Menten na sua forma linearizada de Lineweaver-Burke para se avaliar o mecanismo de inibio da oxidao do guaiacol pela peroxidase.

As Figuras 3 e 4 demonstram as velocidades das reaes de escurecimento enzimtico com diferentes con-centraes de substrato na ausncia e presena dos extratos vegetais. Os grfi cos das fi guras sugerem que a inibio da peroxidase da batata pelos extratos estudados do tipo no competitiva, pois a inclinao das diferentes curvas perma-nece constante, exceto nos casos dos extratos das cascas da banana e da berinjela e da polpas de ma. Na inibio no competitiva, o inibidor no se combina com a enzima livre, nem afeta sua reao normal com o substrato, mas sim com o complexo Enzima-Substrato formando Enzima-Substra-to-Inibidor que no sofre a etapa seguinte da reao para obter o produto.15 Neste caso, indicando que os compostos responsveis pela inibio do escurecimento so fenis de estrutura distinta do guaiacol, possivelmente com maior grau de polimerizao, pois no se ligam ao centro ativo diretamente.

Na Tabela 3 esto apresentados os valores de Km e velocidades mximas estimadas a partir das equaes das retas dos grfi cos de Lineweaver-Burke das Figuras 3 e 4. As velocidades mximas da reao de escurecimento en-zimtico diminuram em presena dos extratos vegetais, o que caracteriza o efeito de inibio da oxidao do guaiacol catalisado pela peroxidase. Os valores de Km das reaes em presena dos extratos fenlicos tambm diminuram em relao reao controle. Isto no ocorreu nas reaes

que continham os extratos das cascas de banana e berinjela e polpa da ma, o que pode confi rmar que estes extratos apresentam um tipo de inibio diferente dos demais, sendo possivelmente decorrente de estruturas fenlicas diferentes dos outros.

Tabela 3 Valores de Km e velocidades mximas das rea-es de escurecimento enzimtico em presena de extratos vegetais.

Tipo de Extrato KmcontroleKm

extratoVmx.

controleVmx.

extratoc. limo 0,60 0,20 0,06 0,011p. limo 0,90 0,40 0,14 0,004c. laranja 0,60 0,25 0,06 0,006p. laranja 0,90 0,002 0,14 0,0005c. ma 0,60 0,065 0,06 0,004p. ma 1,20 1,30 0,073 0,036

c. banana 0,60 1,00 0,06 0,01p. banana 0,90 0,80 0,14 0,06c. berin. 1,00 1,10 0,044 0,018p. berin. 1,20 0,60 0,073 0,057c. batata 0,60 0,40 0,06 0,023p. batata 0,90 0,53 0,14 0,075

arroz 0,90 0,70 0,14 0,03trigo 0,90 0,25 0,14 0,015

p = polpas; c = cascas.

A literatura mostra que as atividades antioxidante e antifngica podem estar relacionadas ao tipo de compos-tos fenlicos presentes em uma ampla variedade de vege-tais6,30,31 fato que motivou a possibilidade de se associar a atividade antifngica e antimicotoxignica com a atividade antioxidante.

Os compostos fenlicos possuem comprovada ao antifngica e esta pode ocorrer, entre outros mecanismos, pela inativao de sistemas enzimticos do microrganismo envolvidos na produo de energia e na sntese de compo-nentes estruturais.22 A atividade antioxidante dos extratos vegetais sobre a atividade da peroxidase pode indicar seu potencial de inibio do desenvolvimento fngico e produ-o de micotoxinas.

Na Figura 5 esto apresentadas as porcentagens de inibio provocadas pelas presenas dos extratos fenli-cos vegetais nas reaes de escurecimento enzimtico e no crescimento do Aspergillus fl avus em 7 dias de incubao. Estas foram denominadas atividade antioxidante e ativida-de antifngica, respectivamente.

Embora sejam propriedades diferentes, permitem a visualizao da intensidade dos dois efeitos. Em geral sempre superior a 50% de inibio de oxidao e desenvol-vimento fngico. Segundo este sistema de comparao, as cascas apresentaram atividade antifngica mais acentuada que a antioxidante, visto que se trata de tecido de prote-o.

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Controle

c.lim

c.lar

c.ma

c.ban

c.bat

c.ber

1/[S] (mL/uL)

1/v

(10m

in/a

bs)

0

100

200

300

400

500

600

700

800

0 1 2 3 4 5 6

FIGURA 3 Demonstrao da velocidade de reao de escurecimento enzimtico em diferentes concentraes de substrato na ausncia e presena de extratos das cascas vegetais. Controle: reao de escurecimento sem adio de extratos vegetais; c.lim = extrato vegetal das cascas de limo; c.lar = cascas de laranja; c.ma = cascas de ma; c.ban = cascas de banana; c.bat = cascas de batata; c.ber = cascas de berinjela.

Controle

p. ma

p. ban

p. bat

p. ber

arroz

trigo

1/[S] (mL/uL)

1/v

(10m

in/a

bs)

0

30

60

90

120

150

180

210

240

0 1 2 3 4 5 6

FIGURA 4 Demonstrao da velocidade de reao de escurecimento enzimtico em diferentes concentraes de substrato na ausncia e presena de extratos das pores comestveis vegetais. Controle: reao de escurecimento sem adio de ex-tratos vegetais; p.ma = extrato vegetais das polpas de ma; p.ban = polpas de banana; p.bat = polpas de batata; p.ber = polpas de berinjela; arroz = extrato de arroz; trigo = extrato de trigo.

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Apenas os extratos das polpas de limo, laranja, ba-nana e de cascas de ma apresentaram atividades antioxi-dantes maiores que a atividade antifngica, sugerindo que a inibio do desenvolvimento fngico foi ocasionada por outro mecanismo ou que esta relao no foi linear.

A determinao de afl atoxinas no meio onde foi inoculado o fungo Aspergillus fl avus revelou que as mes-mas concentraes de extratos fenlicos adicionados ao meio de crescimento que proporcionaram as atividades fngicas apresentadas na Figura 5, provocaram a inibio total da produo de afl atoxina. A produo de afl atoxina B1 ocorreu apenas quando foi empregado extrato de pol-pa de batata que inibiu em 57% a produo da micotoxi-na em relao ao controle. Jayashree & Subramanyam10,11 constataram que o estresse oxidativo foi um pr-requisito para a produo da afl atoxina por A. parasiticus condu-zindo ao aumento da peroxidao lipdica e a gerao de radicais livres. Os mesmos autores observaram10 que um antioxidante fenlico como o eugenol inibe a produo de afl atoxina pela inibio da peroxidao lipdica e passos da biossntese das afl atoxinas sem alterar muito o crescimen-to do A. parasiticus. Os resultados deste trabalho sugerem que a propriedade antioxidante pode ser responsvel pela atividade antimicotoxignica demonstrada pelos extratos fenlicos estudados. Esta ao inibitria sobre a atividade da peroxidase demonstrada pelos extratos fenlicos pode ocorrer, tambm, sobre outros sistemas enzimticos de oxido-reduo que estejam envolvidos nas etapas de sn-tese das micotoxinas por fungos micotoxignicos. No caso deste trabalho o extrato de batata com menor potencial an-tioxidante foi o que no impediu a produo de afl atoxina

B1 como os demais extratos, fato que consistente com o mecanismo sugerido.

CONCLUSES

Os extratos das cascas de limo, laranja e ma apresentaram as maiores inibies sobre a atividade da peroxidase de batata na reao de escurecimento tendo o guaiacol como substrato. Assim como os extratos das pol-pas de limo, laranja e banana.

A avaliao do tipo de inibio enzimtica realizada pelos extratos fenlicos indica que se trata de inibio enzi-mtica do tipo no competitiva, com exceo dos extratos de casca de banana e berinjela e polpa de ma.

Os extratos fenlicos estudados apresentaram inibi-o sobre o crescimento fngico e a produo de afl atoxina B1 pelo fungo A. fl avus, exceto na presena do extrato da polpa da batata.

OLIVEIRA, M.S.; DORS, G. C.; SOUZA-SOARES, L. A.; BADIALE-FURLONG, E. Antioxidant activity of phenolic compounds from plant extracts. Alim. Nutr., Araraquara, v.18, n. 2, p. 267-275, 2007.

ABSTRACT: The purpose of this investigation was to assess the antioxidant activity and measure the phenolic content and antifungal activity of orange, lemon, apple, banana, potato, eggplant, rice and wheat extracts. The extracts were tested for antioxidant activity in an enzymatic

Inib

io

da

rea

o d

e es

cure

cim

ento

e c

resc

imen

to f

ngic

o (%

)

0

20

40

60

80

100

p. lim p. lar p. ma p. ban p. ber p. bat arroz trigo c. lim c. lar c. ma c. ban c. ber c. bat

Ativ. antioxidanteAtiv. antifngica

FIGURA 5 Atividade antioxidante e atividade antifngica de extratos vegetais contendo compostos fenlicos. lim = limo; lar = laranja; ma = ma; ban = banana; ber = berinjela; bat = batata; p. = polpa; c. = casca.

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system, by assaying the reduction of peroxidase activity. The total phenols were estimated spectrophotometrically, with Folin-Ciocalteau reagent. Antifungal activity against both the growth of toxigenic fungus Aspergillus fl avus and its production of fl atoxin B1 were examined on potato dextrose agar plates. The maximum reaction rates indicated that the plant extracts under study promoted inhibition from 22% to 98% of the enzymatic browning reaction in 10 minutes. The velocity profi les of browning reactions at various substrate concentrations suggest that the inhibition of the reactions is of the uncompetitive type, except for the banana peel, eggplant and apple pulp extracts. Only the lemon, orange and banana pulp and apple peel showed stronger antioxidant than antifungal activity against Aspergillus fl avus. However, all the phenolic extracts, with the exception of potato pulp, totally inhibited afl atoxin production by this fungus.

KEYWORDS: Antioxidant activity; phenolic compounds; antifungal activity; mycotoxins; peroxidase.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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