aspiraçao folicular, metodologia, eficiência, sequelas

8/9/2019 Aspiraao Folicular, metodologia, eficincia, sequelas

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Congresso Brasileiro de Reproduo Animal, 16, 2005, Goinia, GO. Anais: Palestras

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Aspirao folicular in vivo: metodologias, eficincia e seqelasOvum pick up: methodology, efficiency and damages

M.M. Seneda, W. Blaschi, K.C.P. Rubin, L.A. Lisboa

Departamento de Clnicas Veterinrias Centro de Cincias Agrrias - UEL, Londrina, PR, 86051-990Correspondncia: [email protected]

Introduo

A obteno de ocitos disponveis para produo in vitro de embries (PIV) ocorre atravs da tcnica deaspirao folicular transvaginal, ou OPU (ovum pick up). H mais de uma dcada a OPU tem sido a melhor opopara a recuperao de ocitos in vivo na espcie bovina[1].

Anterior ao advento da ultra-sonografia, vrios procedimentos foram propostos, e a laparoscopia trans-vaginal [2] ou paralombar [3] permitiram o aproveitamento de ocitos de animais vivos. Consistindo de um pro-cedimento cirrgico menos cruento que a laparatomia, a laparoscopia permitiu a recuperao de ocitos em novi-lhas [4], e mesmo em bezerras de apenas 3 semanas de idade [5]. Apesar das perspectivas promissoras, limitaespara a laparoscopia foram listadas por Looney et al. (1994)[6]. Estes autores comentaram ser a tcnica trabalhosa,

alm da ocorrncia de fibroses e aderncias ovarianas aps sua realizao. Hinrichs et al. (1990) [7] propuseram arecuperao de ocitos atravs da tcnica de colpotomia, na qual a puno dos ovrios viabilizada por meio deuma inciso no fundo de saco vaginal. Mas os riscos de peritonite e eviscerao atravs da inciso vaginal limita-ram a expanso deste procedimento.

Valendo-se das possibilidades da ultra-sonografia, Callesen et al. (1987) [8] relataram pela primeira vezo uso desta tcnica para a obteno de ocitos bovinos, atravs da puno ovariana transcutnea na regio para-lombar. Um ano depois, Pieterse et al.(1988) [9], descreveram a aspirao folicular transvaginal atravs da ultra-sonografia, que tornou vivel o aproveitamento de ocitos bovinos, sem as limitaes dos procedimentos existen-tes at ento. Aps avaliaes iniciais, a tcnica mostrou-se simples e aplicvel, viabilizando a obteno repetidade ocitos destinados aos procedimentos in vitro [10-14], inclusive com citaes de aumento no nmero de fol-culos aps vrias semanas de aspiraes foliculares [15]. Outro aspecto favorvel da OPU/PIV a possibilidadede se conseguir embries mesmo em fmeas gestantes. Isto possvel porque os ovrios mantm sua atividadedurante a prenhez, tornando vivel a recuperao dos ocitos. Se a tcnica de OPU for bem conduzida, no hqualquer risco gestao e pode-se realizar a aspirao folicular at o terceiro ms de prenhez, ou at o perodoem que o mdico veterinrio conseguir manipular os ovrios sem que seja necessria uma trao vigorosa.

A possibilidade de obteno de embries em situaes de infertilidade extra-ovariana motivou vriosgrupos realizao do procedimento, tendo-se verificado nascimento de diversos produtos [6, 16-18], confirman-do as observaes de Dawson (1977) [19], a respeito de que a maioria das fmeas bovinas classificadas como in-frteis mostrava-se capaz de produzir gametas viveis. Se a aspirao folicular apresentou-se vivel para fmeascom limitaes reprodutivas, sua aplicao mostrou-se mais ampla quando utilizada em fmeas saudveis, produ-zindo quatro vezes mais embries em relao TE [20], embora com maior custo por embrio [21].

Objetivando aumentar a eficincia e reduzir o investimento inicial para realizao da tcnica, a OPU temsido estudada por diversos grupos [22]. A maior produo de embries pelo procedimento in vitro em relao TE, tem feito com que muitos criadores tambm optem pela PIV, buscando mais rapidez na produo de descen-dentes de vacas de linhagens superiores. A biotecnologia referente a PIV encontra-se difundida por vrios pases,

mas o Brasil alcanou uma posio de destaque frente ao nmero surpreendente de embries produzidos por estatcnica. Isto se deve a uma particularidade conferida s vacas zebunas, que em geral apresentam maior nmerode folculos recrutados por onda, em comparao com vacas de raas europias [23-24]. Em especial, destacamosa valorizao da raa Nelore nos ltimos anos como responsvel pelo crescimento bastante rpido da PIV no Bra-sil. Alm dessa variao do tipo racial gado europeu ou zebuno h as variaes individuais, e outros fatoresde ordem biolgica e tcnica diretamente relacionados eficincia do procedimento de aspirao folicular in vivo.

Os aspectos tcnicos compreendem tipo e freqncia do transdutor, a agulha de puno, presso de v-cuo, enquanto os de ordem biolgica abrangem as variaes individuais, fase reprodutiva, terapias gonadotrficase tamanho dos folculos, aspectos a serem abordados adiante. O conhecimento das variveis tcnicas contribuipara o evidente crescimento da aspirao folicular, no entanto essencial que este procedimento seja realizadocom muito critrio, de forma a evitar danos doadora. Considerando o fato dos ovrios serem as estruturas res-ponsveis pelo armazenamento e viabilidade de todos os gametas femininos [22].


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Metodologias

Considerado ser a aspirao transvaginal com a ultra-sonografia o mtodo mais eficiente para obtenode ocitos in vivo, as consideraes sero referentes esta tcnica. Atravs do exame ultra-sonogrfico as fmeascom baixo potencial para o fornecimento de ocitos podem ser identificadas momentos antes da OPU. Como es-

tratgia para a melhoria da relao custo benefcio nos programas de PIV, as doadoras podem ser classificadascomo aptas quando o exame ultra-sonogrfico dos ovrios apresentar uma populao satisfatria de folculos comdimetro maior que 3 mm [25]. A freqncia do transdutor constitui-se em varivel importante no processo derecuperao dos ocitos [26]. H citaes de freqncias de 3.5 MHz [8], 7.5 MHz [27, 47], 5.0 MHz [1,16,41] e6.5 MHz [28,45].

O transdutor endo-vaginal humano, ou micro-convexo, mostrou-se altamente adequado s condiesanatmicas de vacas pequenas e novilhas pr-pberes [29], alm de permitir tima visualizao dos folculos emvacas de grande porte, por facilitar a manipulao ovariana, apresentar uma imagem com alta resoluo e possuirimagem com grande ngulo de abertura [30]. A maioria dos autores cita a utilizao de transdutores convexos ousetoriais para a aspirao folicular transvaginal [14,6,13,31-32], com poucos relatos de transdutores lineares[26,33]. O transdutor setorial demonstrou ser mais eficiente para a visualizao de pequenos folculos, quandocomparado ao transdutor linear [1]. No entanto, o transdutor linear bastante difundido na rea de reproduo emgrandes animais [34-38] e a sua utilizao para a aspirao folicular transvaginal foi demonstrada com sucesso

[39]. O principal aspecto desfavorvel da aspirao com o transdutor linear refere-se ao espao limitado entre otransdutor e a agulha. A restrio de espao impede que todas as regies do ovrio sejam puncionadas, mesmomodificando-se o posicionamento da gnada. evidente que os transdutores do tipo convexo propiciam um pro-cedimento mais rpido e facilitado [30]. No entanto, a versatilidade do transdutor linear deve sempre ser conside-rada quando a utilizao do ultra-som no for exclusiva para OPU. Neste caso, possvel a obteno de resulta-dos satisfatrios sem a necessidade de aquisio de outro transdutor.

Inicialmente, a aspirao era realizada apenas com agulhas longas (55 cm), produzidas especificamentepara aspirao folicular [9]. Posteriormente, props-se a substituio por agulhas hipodrmicas descartveis, poisas agulhas descritas inicialmente apresentavam custo elevado e perdiam o gume rapidamente, prejudicando a re-cuperao dos ocitos [12]. Em relao s agulhas longas, devido ao preo, comum observar-se que uma mesmaagulha seja utilizada para vrios animais. Com a perda do gume, o bisel apresenta menor capacidade de penetrar oovrio, obrigando o operador a utilizar mais fora durante a puno. Nesta situao, h dois aspectos desfavor-veis. O primeiro e mais grave a possibilidade de danos ao estroma ovariano, especialmente naqueles animaissubmetidos repetidas vezes tcnica. O segundo aspecto refere-se pior recuperao de ocitos. medida que aagulha vai se tornando romba, aumentam as possibilidades de ocorrer uma ruptura abrupta do folculo almejado,ao invs de uma perfurao rpida e precisa. Esta ruptura abrupta poderia dificultar a captao do ocito do inte-rior do folculo, reduzindo a eficincia da tcnica. Considerando estes aspectos crticos da agulha longa, Bols etal. (1997)[40] demonstraram a viabilidade da utilizao de agulhas hipodrmicas descartveis de 18 e 19 Gauge(G) e 50 mm de comprimento [1]. As agulhas com dimetros maiores de 18 G relacionaram-se a maiores taxas derecuperao embora com maior percentual de ocitos desnudos, alm de maiores danos ao estroma e maior quan-tidade de sangue no lquido aspirado. J as agulhas de dimetro menor que 19 G apresentam ndices reduzidos derecuperao de ocitos, possivelmente pela lentido da aspirao do lquido folicular, no momento da puno.Uma vez verificada a possibilidade de utilizao de agulhas hipodrmicas, buscou-se avaliar a relao entre ocomprimento do bisel da agulha e a taxa de recuperao de ocitos [40]. Estes autores acreditavam que o biselcurto seria mais eficiente, pela maior facilidade de ser introduzido rapidamente no interior do folculo. Contrari-

ando as expectativas, os autores relataram melhor recuperao e qualidade de ocitos quando agulhas de bisellongo foram utilizadas [41]. A provvel justificativa seria o gume mais afiado do bisel longo, permitindo umapenetrao rpida e precisa no interior do folculo, dificultando o extravasamento do contedo folicular. A melhoreficincia das agulhas de bisel longo constituiu aspecto bastante favorvel, j que estas so mais baratas e facil-mente adquiridas, quando em comparao com as de bisel curto. Em relao ao comprimento, as agulhas hipo-drmicas de 50 mm possuem restrita distribuio no mercado, mas so perfeitamente substituveis pelas de 40mm. Portanto, em relao s agulhas hipodrmicas descartveis, as opes mais viveis no mercado nacional seri-am as agulhas 40mmx9 e 40mmx10. Considerando seu preo irrisrio, torna-se perfeitamente possvel utilizaruma agulha por vaca, ou mesmo uma por ovrio, naqueles animais que apresentarem maior nmero de folculospara aspirao. Desta forma, o procedimento de recuperao dos ocitos pode ser realizado com mnimos danosao estroma ovariano [22].

Estreitamente relacionado com a agulha utilizada encontra-se a presso de vcuo [42]. Estes autores rela-cionaram que baixas presses, como 50 mm Hg, foram pouco eficientes para a aspirao, enquanto que presses


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maiores como 120 mm Hg danificavam o revestimento do cumulus oophorus. H uma grande variao entre ostrabalhos, com valores de 40 a 400 mm Hg [14], embora isto deva ser considerado com reservas, j que todo osistema (comprimento e dimetro de conexes, altura do equipamento de vcuo, dimetro da agulha) pode influ-enciar na presso de vcuo final. Para quantificar a presso negativa de forma mais real, sugere-se mensurar ovcuo em volume de fluido por minuto. Mesmo assim, h variaes considerveis, de 4,4 a 40 ml de gua/minuto

[9,43-45]. O intervalo entre 10 a 20 ml de fluido por minuto tem sido o mais utilizado atualmente, sendo pertinen-te que a aferio seja readequada a cada procedimento. As bombas de vcuo descritas inicialmente Handle Cook foram especialmente designadas para a obteno de ocitos em vacas [9]. Tais equipamentos possuem grandeestabilidade na presso de vcuo, permitindo considervel eficincia na recuperao dos ocitos. Um aspecto des-favorvel seu custo elevado, fator que motivou a busca de bombas de vcuo alternativas. Verifica-se atualmentea utilizao alternativa de bombas de aspirao odontolgicas, de fluidos endotraqueais, alm de bombas de infu-so controlada. Todos estes equipamentos prestam-se gerao de vcuo, embora as variaes na capacidade degerar presso negativa possam comprometer a quantidade e qualidade dos ocitos.

Eficincia

A eficincia do procedimento de aspirao folicular transvaginal est diretamente relacionada a metodo-logia adequada. Sendo que as variveis tcnicas para a obteno de ocitos possuem considervel impacto sobre a

quantidade e a morfologia dos complexos cumulus oophorus (CCOs), e conseqentemente sobre a competnciapara o desenvolvimento [40]. Outro aspecto relevante est relacionado as variaes individuais entre doadoras,considerando-se peso, idade e a prpria variao fisiolgica de cada animal. Relatos de ocitos de qualidade infe-rior em animais senis so freqentes. Looney et al. (1994) [6] relataram a possibilidade de aspirao folicular nosanimais bastante jovens, e Brogliatti e Adams (1996) [46] obtiveram ocitos de bezerras com apenas 6 semanasde idade com a utilizao de um transdutor adequado. A origem dos ocitos apresenta um significativo impactopara o seu potencial desenvolvimento. Os animais pr-pberes tm mostrado reduzida competncia de seus oci-tos para chegar at blastocisto [48-49], embora Armstrong et al. (1994) [5], tenham conseguido resultados anima-dores com bezerras de apenas trs semanas de idade atravs do estmulo gonadotrfico. Os animais senis produ-zem poucos ocitos e com baixo percentual de desenvolvimento, alm da baixa qualidade devido ao pequeno n-mero de camadas de clulas do cumulus [50]. Parece haver um consenso quanto condio corporal, em que ani-mais subnutridos seriam doadores de ocitos com menor capacidade para desenvolverem-se at blastocisto [51], eh indcios de que animais submetidos situaes de estresse tambm seriam doadores de ocitos menos compe-tentes [52].

Em relao variao individual, o aspecto mais interessante refere-se raa. Animais da raa Nelore,ou vacas zebunas em geral apresentam normalmente um maior nmero de folculos recrutados por onda, emcomparao com vacas de raas europias [23-24]. Esta particularidade viabilizou um crescimento bastante rpidoda PIV no Brasil, uma vez que a disseminao da PIV e a maior valorizao da raa Nelore ocorreram de formasimultnea. Embora a TE continue sendo largamente utilizada em animais da raa Nelore, a PIV viabiliza maiornmero de embries em um mesmo perodo de tempo [53]. A raa Nelore tem sido promissora ao ponto de seconsiderar que a aspirao folicular semanal pode produzir um bezerro por semana, atravs da PIV [54]. Apesardo semelhante potencial entre os indivduos da mesma raa, a variabilidade individual entre doadoras na produode uma populao vivel de folculos pode influenciar os resultados da OPU. Leivas et al. (2003) [55] observaramque houve uma significativa variao na mdia do nmero de CCO entre as doadoras Bos indicus, submetidas aomesmo nmero de sesses de OPU. Parmetros reprodutivos como o recrutamento e desenvolvimento folicular

podem variar amplamente entre pares de gmeas monozigticas [56].Apesar do enfoque para a espcie bovina, a comparao entre vacas (Bos indicus) e bfalas (Bubalus bu-balis), tornou-se relevante devido a disseminao da tcnica de PIV. As estruturas ovarianas nas bfalas foramcerca de 50% inferiores as observadas nas vacas zebunas [57]. Estes resultados podem refletir a maior dificulda-de, na espcie bubalina, para obteno de embries in vitro [58], comparativamente ao bovino zebuno, em virtu-de do menor nmero de folculos e ocitos com cumulus compacto obtido por ovrio [57].

Atualmente, a aspirao folicular tem sido realizada em momentos aleatrios do ciclo estral. Os resulta-dos de campo tm mostrado que a qualidade dos ocitos no se altera com funo da fase do ciclo estral. No en-tanto, o nmero de folculos disponveis para a aspirao apresenta considervel variao, sendo o incio de ondao momento mais favorvel para a recuperao, pelo maior nmero de folculos e pela melhor eficincia de capta-o dos ocitos, de acordo com Seneda et al. (2001) [59]. Hendriksen et al. (2004) [27] atriburam ao folculodominante o fato de reduzir o desenvolvimento e a competncia dos ocitos pertencentes aos folculos subordina-dos. Portanto, a OPU realizada nos dias 2-5 do ciclo estral ou 2-5 dias aps a divergncia do folculo dominante


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poderia incrementar a PIV [27].A competncia do ocito obtido pela aspirao folicular transvaginal parece no ser influenciada pelo

tamanho do folculo, mas o mesmo no ocorre em relao taxa de recuperao, que demonstrou ser significati-vamente superior para folculos menores ou iguais a 4 mm [60]. A taxa de recuperao consiste no nmero deocitos recuperados aps puno de 100 folculos [9] e j foi demonstrado que folculos menores viabilizam re-

cuperao oocitria mais eficiente [59]. A taxa de recuperao pode ser influenciada pelas terapias gonadotrficas[13,61]. Roover et al. (2005) [28] consideraram que a aplicao exgena de FSH foi capaz de aumentar o tama-nho dos folculos, mas no houve alterao quantitativa, atribuindo a este ltimo aspecto, como uma variao in-dividual. Pieterse et al. (1992) [61] realizaram a aspirao folicular trs dias aps estmulo gonadotrfico comPMSG e relataram aumento do nmero e tamanho de folculos, e pior taxa de recuperao de ocitos. Pieterse etal. (1991) [11] e Goodhand et al. (1999) [62] relataram melhor recuperao quando predominavam folculos pe-quenos no ovrio e menos ocitos por sesso quando havia predomnio de folculos maiores que 6 mm. Resulta-dos anlogos foram descritos por Seneda et al. (2001) [59], ao compararem folculos < 4 mm e > 4 mm.

A relao inversa entre maior dimetro folicular e taxa de recuperao de ocitos por sesso tem sidojustificada de diversas formas, como alteraes morfolgicas no complexo cumulus oophorus [31], viscosidadedo fluido folicular [62] e quantidade de material a ser aspirado e presso intrafolicular [63]. Apesar dos folculosmaiores que 5 mm serem aspirados mais facilmente [64], a aspirao de folculos pequenos mostrou-se mais efici-ente quanto captao dos ocitos [59]. Assim, a estratgia mais eficiente para associar utilizao de FSH e pre-

sena de folculos pequenos controlar o perodo de crescimento folicular, conforme relatado por Seneda etal.(2002) [24]. Os resultados de Ueno et al. (2004) [65] sugeriram que a aplicao exgena de LH aumentou onmero e a qualidade dos ocitos recuperados nos folculos com 5-8 mm de dimetro, quando comparados aosanimais que foram tratados apenas com FSH.

Apesar de relatos em animais zebunos [67], importante ressaltar que a utilizao de gonadotrofinastem acontecido principalmente em vacas de raas europias. Os animais Bos indicus apresentam naturalmentemaior nmero de folculos por onda, e talvez por este motivo o FSH tenha tido um impacto menor no crescimentofolicular e conseqente disponibilidade de ocitos para a produo de embries [68].

Merton et al. (2003) [69] consideraram que a utilizao de FSH anterior aspirao folicular durante 2semanas otimizou a produo de embries por sesso. No entanto, a freqncia de OPU afetou a qualidade e aquantidade dos ocitos coletados. A OPU quando realizada de forma descontnua (entre o incio do estro e 12 diasaps), permitiu que as doadoras retornassem a ciclicidade de forma natural, no afetando a funo ovariana. En-tretanto, a OPU contnua pode alterar o perodo de ovulao. Os estudos de Petyim et al. (2003) [70] demonstra-ram que o nmero de ocitos no diferiu em ambos os esquemas de aspirao, mas sugeriram que a OPU descon-tnua seja aplicada.

A aspirao folicular in vivo eficiente ao ponto de produzir embries in vitro partir de doadoras cominfertilidade adquirida. Vacas Nelore clinicamente saudveis e que no responderam a TE e a inseminao artifi-cial (IA), produziram embries in vitro viveis e prenhezes partir dos ocitos recuperados pela OPU [71]. Entre-tanto, no caso das salpingites graves associadas a aderncia ovariana, a qualidade dos ovcitos foi comprometidae, conseqentemente, a PIV. As patologias de tuba uterina que no apresentam aderncias permitiram a obtenode embries in vitro, ainda que com baixos ndices [72].

Mesmo diante de inmeras vantagens, a OPU pode ter sua eficincia alterada pelas variveis biolgicas etcnicas, como abordado anteriormente. Devemos tambm considerar a habilidade do operador, como um impor-tante fator capaz de influenciar os resultados da OPU. Portanto, a seleo de doadoras, a metodologia adequada ea habilidade do operador formam o conjunto de fatores que podem interferir na obteno de ocitos.

Seqelas

Com o advento da tcnica de PIV, tornou-se possvel um elevado aproveitamento gentico de animais se-lecionados. De forma rpida e eficiente, esta biotecnologia mostrou ser capaz de proporcionar um grande nmerode descendentes. A avaliao peridica dos animais submetidos a punes foliculares pode favorecer o monitora-mento da ocorrncia e intensidade de leses subseqentes ao procedimento.

Os resultados de Viana et al. (2002) [73] demonstraram que as perfuraes do fundo de saco vaginal fo-ram prontamente cicatrizadas, e em apenas duas ocasies foram observadas irritaes transitrias da vagina e cr-vix. Em geral no se observou processos clnicos inflamatrios ou infecciosos na vagina ou no restante da porotubular do trato genital [74]. J os pontos de perfurao do fundo de saco vaginal puderam ser identificados at 48a 72 horas aps as punes [74]. A formao de hematomas na regio perivaginal tambm pode ser encontrada[29] mas esta condio no parece acarretar grandes problemas para a doadora. Ao contrrio do observado na re-


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gio vaginal, Viana et al. (2003) [74] constataram a incidncia de significativas alteraes na consistncia ou mo-bilidade dos ovrios. As perfuraes dos ovrios podem ocasionar o aparecimento de seqelas como aderncia efibrose, particularmente em vacas submetidas a muitas sesses de puno. importante considerar o grande im-pacto das variveis tcnicas e a habilidade do operador na ocorrncia destas leses.

Alteraes histolgicas como a mineralizao do parnquima ou no interior de estruturas foliculares, fo-

ram encontradas independente do nmero de sesses de puno folicular em que as vacas foram submetidas [75].Pontos de perfurao na tnica albugnea, presena de reas com hemorragias e infiltrados de clulas inflamat-rias, fibrose no estroma ovariano, associado a cicatrizes no trajeto da agulha, constituram as alteraes histopato-lgicas ovarianas demonstradas por Viana et al. (2003) [74].

Em fmeas submetidas a bipsia guiada por ultra-sonografia transvaginal, o exame histolgico demons-trou intenso infiltrado de clulas vermelhas no estroma variano [76]. Analisando animais puncionados, Demarqueet al (2003) [75] observaram atravs da histologia a presena de corpo lteo e de folculos normais, indicandoatividade cclica ovariana regular.

Viana et al. (2003) [74] observaram que folculos previamente aspirados apresentaram hemorragia inter-na e graus variados de desorganizao das camadas da parede folicular. Observou-se tambm, a presena de reasde tecido luteal ou de clulas luteais dispersas no estroma ovariano, provavelmente originadas da luteinizaoparcial de folculos cuja parede foi fragmentada pela puno. A luteinizao de folculos puncionados, emparticular, seria responsvel pelas concentraes subluteais de progesterona observadas em animais puncionados

intensamente [77].Nos ovrios submetidos a maior nmero de punes, o espessamento do epitlio ovariano, comprometeu

a visualizao externa dos folculos em crescimento, quando os ovrios foram avaliados macroscopicamente [74].Animais submetidos a at 20 sesses de puno, apresentaram baixa incidncia de leses, coerente com a obser-vao de que o procedimento no causa, necessariamente, comprometimento da atividade ovariana [66].

Viana et al. (2002) [73] no observaram reduo na recuperao de ocitos por vaca no decorrer do seuperodo experimental, mesmo quando foram constatadas seqelas ao tratamento.

importante considerar que a aspirao folicular uma tcnica que possui prs e contras. O risco de se-qelas existe e deve ser considerado. A realizao do procedimento deve ser feita de maneira a reduzir ao mximoos danos possveis, para que os resultados obtidos superem os inconvenientes previstos.

Perspectivas

A obteno de ocitos atravs da aspirao folicular in vivo apenas a primeira etapa para a produo invitro de embries. Depois que os ocitos so recuperados, os processos de maturao, fecundao e desenvolvi-mento so realizados em laboratrios especficos.

Os principais desafios para maior disseminao da aspirao folicular so o alto custo dos equipamentose a dedicao necessria ao treinamento da tcnica. Maior padronizao na recuperao dos ocitos ser obtidacom a aplicao de protocolos de sincronizao do estro, visando a realizao da aspirao em momentos maispropcios.

Finalizando, importante salientar que a OPU/FIV no boa, nem m. Como toda biotcnica, trata-se deuma ferramenta a servio da pecuria. Se usada adequadamente, propicia resultados satisfatrios, correspondendos expectativas do investimento. No entanto, se mal utilizada, pode causar danos s doadoras, ou, o que pior,gerar grande nmero de animais geneticamente inferiores.

Portanto, ressaltamos a necessidade da anlise cuidadosa de cada proposta de trabalho com OPU/FIV,

tanto por parte dos criadores como dos veterinrios, para que a melhor parcela desta biotcnica possa contribuirpara o engrandecimento da pecuria nacional.

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aspiraçao folicular, metodologia, eficiência, sequelas

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