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de dicho trabajo como son la desnaturalización, agre-gación, hibridación, entre otras. Además, es necesario tener la seguridad de hacer bien la tarea a la hora de pe-sar, centrifugar, añadir, incubar a temperaturas exactas y controladas, pues un error en alguno de estos pasos po-dría tener como consecuencia resultados inaceptables.

Es por esta razón que la ubicación y distribución de las áreas en el laboratorio es un factor muy importante y facilitará o no el flujo de trabajo apropiado, tal como se muestra en la Figura 1.

De esta forma se podrá contar con áreas que requie-ren un estricto ambiente libre de contaminación como es el caso del área de preparación de mezclas maestras y se podrá continuar en cada etapa del proceso en la dirección adecuada hasta llegar al punto final del mismo que es el área de detección.

B I O L O G Í A M O L E C U L A R

ASPECTOS NORMATIVOSDEL TRABAJO MOLECULAR

Sandy Carolina Salazar Castañeda*

Indudablemente el laboratorio de biología molecu-lar ha cobrado gran relevancia e importancia en la última década en el ámbito del diagnóstico clínico.

El incremento en el uso de técnicas diagnósticas funda-mentadas en esta área de la ciencia ha permitido im-portantes avances en la detección temprana de la en-fermedad y por ende su oportuno tratamiento; y como consecuencia hoy en día se podría decir que una buena parte de los laboratorios clínicos de alta complejidad a nivel nacional, han implementado áreas de trabajo es-pecializadas en la aplicación de este tipo de técnicas. Por sus características, el uso de dichas técnicas genera para los laboratorios clínicos o para los dedicados a la biología molecular, la necesidad de mantener sistemá-ticamente las buenas prácticas de laboratorio (BPL) y la implementación de normas técnicas de referencia internacional apropiadas. Al realizar dicha implementa-ción se podrá facilitar el control sobre los procesos en especial los de tipo operativo a fin de obtener resultados confiables que no solo contribuyan a un diagnóstico, pronóstico y tratamiento acertado para el paciente, sino también a ganar la confianza y credibilidad en el cuerpo médico y como consecuencia lograr su competitividad dentro del sector salud.

Por lo anterior, es indispensable que se incentive y se promueva en nuestro medio, la implementación de dichas normas y es por esta razón que se pretende a continuación en una general descripción, reconocer al-gunas de las normas que actualmente podrían aplicarse en un laboratorio que tenga incorporado dentro de sus áreas de trabajo el de la biología molecular.

¿Qué características debe tener un laboratoriode biología molecular?

El laboratorio que lleva a cabo técnicas de biología molecular requiere un ambiente controlado y libre de peligros en el momento de realizar las prácticas propias

* Bacterióloga. Especialista en Administración y Gerencia de Sis-temas de Calidad.

LAB 3PCR

Area 3

LAB 2

SpecimenPreparation

Area 2

LAB 1

ReagentPreparation

Area 1

OUT

IN

Figura 1. Distribución de áreas de trabajo en el laboratorio.tomado de Molecular Diagnostic Handbook IAEA/FAO 2005.

Detection

Area 3

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Figura 3. Clasificación del laboratorio según grupos de riesgo de acuerdo con el organismo y/o microorganismo involucrado.

Grupo Riesgo

1Grupo Riesgo

2Un microorganismoque no causaenfermedad alos humanos o

animales

Causa seria enfermedada los humanoso animales

Puede ser fácilmentetransmitido de unindividuo a otrodirecta o indirectamente

Usualmente nose cuenta contratamientos disponibles

Causa enfermedada los humanos o animalespoco probable afectetrabajadores, comunidad, ambiente

Exposición puedecausar infección

Disponibilidad detratamiento y propagaciónlimitada

Causa seria enfermedada los humanoso animales

No se propagafácilmente de unindividuoinfectado a otro

Se cuenta condisponibilidadde tratamiento omedidas preventivas

No tiene o tiene un riesgobajo individual

o a la comunidad

Alto riesgo individualy bajo riesgo

a la comunidad

Riesgo moderadoindividual y

bajo a la comunidad

Alto riesgoindividual

y a la comunidad

Grupo Riesgo

3Grupo Riesgo

4

Así mismo, es importante tener claridad sobre cual es el nivel de bioseguridad y tipo de contención reque-ridos por el laboratorio, lo cual se puede determinar te-niendo en cuenta el tipo de materiales, organismos y/o microorganismos involucrados en las pruebas. En este aspecto vale la pena apoyarse en las directrices desa-rrolladas por la Organización Mundial de la Salud, por ejemplo en el Manual de Bioseguridad (Laboratory biosafety manual)1 que esta entidad emite y el cual presenta información sobre la prácticas y procedimien-tos operacionales requeridos para trabajar con agentes de diversos riesgos tal como se muestra en las figuras 2, 3 y 4. De esta forma, la denominación de un nivel de bioseguridad incluye una evaluación de riesgos. Por ejemplo, un agente del grupo de riesgo 2 (Ver figura 3) puede requerir Nivel de Bioseguridad 2 con el equipo, prácticas y procedimientos para una conducta segura de trabajo. Sin embargo, si algunos experimentos pudieran generar alta concentración de aerosoles entonces debe-ría considerarse la bioseguridad nivel 3.

Aunque la normatividad vigente elaborada y dis-ponible en Colombia no incluye normas de referencia específicas para la Bioseguridad del laboratorio clínico,

Figura 2. Nivel de Bioseguridad según el tipo decontención requerida.

Bioseguridad Nivel 3

Bioseguridad Nivel 2

Bioseguridad Básica Nivel 1

cabe destacar que dentro del plan de trabajo normativo que actualmente desarrolla el comité técnico N° 187 de Laboratorios clínicos del Instituto Colombiano de Nor-

mas técnicas en Colombia (ICONtEC), se ha incluido recientemente el estudio de una serie de normas de re-ferencia internacional con el fin de elaborar una Guía

Bioseguridad Nivel 4Máxima contención

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NIVEL D

E CA

LIDA

Dtécnica Colombiana (GtC), que proporcionará orienta-ciones en este tema para los diferentes tipos de labora-torio, incluyendo por su puesto el que realiza trabajos de biología molecular.

¿Qué requisitos legales debe cumplir unlaboratorio de Biología molecular?

Actualmente, además de las condiciones generales requeridas para el servicio de laboratorio clínico que se describen en los diferentes estándares del Sistema Único de Habilitación, el cual a su vez hace parte del Sistema Obligatorio de Garantía De La Calidad De La Atención De Salud (SOGCS)2 y del Sistema General de Segu-ridad Social en Salud (SGSSS), se describen también requerimientos específicos que deben cumplir los labo-ratorios clínicos que cuentan con servicio de biología molecular, tal es el caso de los estándares relacionados con Recursos humanos y con Dotación y mantenimien-to. Esto con fines de habilitar a un prestador los servicios correspondientes.

Por otra parte, a la luz del Decreto 2112 de 20033, es un requisito legal para los laboratorios públicos y pri-vados en Colombia que realicen pruebas de paternidad, o maternidad con marcadores genéticos de ADN, el im-plementar, mantener y acreditar un Sistema de Gestión de la Calidad. Por esta razón y por ser la norma que en su género fue primeramente aplicada en el ámbito de la acreditación, la NtC-ISO17025 fue la norma de elec-ción para muchos laboratorios de genética en Colombia con fines de acreditación. Igualmente, había sido hasta ahora la Superintendencia de Industria y Comercio el organismo competente quien lideraba tal proceso, sin embargo, en la actualidad se ha generado la expectati-

va sobre el futuro de los procesos de acreditación y las normas a ser adoptadas una vez se ha formado el Orga-nismo Nacional de Acreditación en Colombia (ONAC).

¿Qué normas de calidad nacionales einternacionales podría aplicar un laboratoriode Biología molecular?

Se pueden listar entre otras las siguientes normas de índole internacional que son aplicables a este tipo de laboratorio y cuyas ventajas y desventajas de aplicación dependerán en gran parte de las necesidades puntuales que tenga el laboratorio clínico con su entorno o por su proyección de servicios.

NtC-ISO 9001:2008 Sistema de Gestión de la Calidad: Requisitos.NtC-ISO 17025:2005 Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y de la calibración.ISO 15189:2007 Laboratorios clínicos: R equisi-tos particulares para calidad y competencia.CAP (AMERICAN PAtOLOGISt COLLEGE): Sep 2007 Molecular Pathology.BPL (Buenas prácticas de Laboratorio).

Con el ánimo de ilustrar el nivel de exigencia al que conduce la implementación de las normas aplicables, se muestra en la Figura 5, que si un laboratorio quisie-ra iniciar un trabajo de aplicación de las mismas sería conveniente comenzar por aplicar los requisitos base que son los de tipo legal y luego podría continuar el trabajo diseñando un Sistema de Gestión de la Cali-dad aplicando la Norma 9001:2008, de tal forma que se pueda contar con una gestión por procesos con sus actividades, recursos y controles pertinentes y de esta forma poder gradualmente hacer más rigurosos los es-tándares de operación apoyándose en las normas con fines de acreditación como son la NtC-ISO17025:2005, ISO15189:2007 NtC 5250:2004) o CAP (AMERICAN PAtOLOGISt COLLEGE).

Figura. 4. El laboratorio de contención - bioseguridad nivel 3.

Figura 5.

ISO 17025 ISO 15189 CAP BPL

?ACREDITACIÓN

ACREDITACIÓN DE ATENCIÓN EN SALUD

ISO 9001:2008

REQUISITOS LEGALESHABILITACIÓN - Resolución 1043 de 2006

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¿Cómo se acredita un laboratorio de Biologíamolecular en Colombia?

Una vez el laboratorio ha seleccionado la norma o normas que quiere implementar con fines de acredita-ción, es necesario que defina el alcance de la acredi-tación, es decir, describir específicamente las pruebas y técnicas utilizadas así como las metodologías a ser aplicadas. Luego tendrá que seleccionar el organismo indicado para llevar a cabo las auditorias externas o de tercera parte. Para conseguir la acreditación, con base en algunas normas (NtC-ISO 17025) el laboratorio po-drá contar con el servicio de un organismo nacional, para otras tendrá que acudir a la contratación de un organismo internacional (CAP, ISO 15189).

tal como lo describe la norma ISO 15189 en su in-troducción “Es preferible que un laboratorio que busca la acreditación, seleccione un organismo de acreditación que opere con base en las normas internacionales apro-piadas y que tenga en cuenta los requisitos particulares de los laboratorios clínicos”. Como ya se había men-cionado, los organismos que actualmente llevan a cabo actividades de acreditación en Colombia son la Super-intendencia de industria y comercio y en un futuro no muy lejano iniciará sus labores la ONAC.

¿Qué principios se requieren para hacer gestiónde calidad?

Definitivamente cualquier Sistema de Gestión de la Calidad en cualquier tipo de organización, debe estar cimentado en los principios que presenta la norma ISO 9000:2005 (numeral 0.2) con el fin de obtener los resul-tados esperados. Dicho principios incluyen:

Enfocarse en el cliente, en quien recibe el servi-cio, procurando satisfacer sus necesidades.Liderazgo, para conseguir trabajo en equipo y unidad de propósito.Participación del personal, para involucrar a to-dos e incentivar el compromiso.Enfoque basado en procesos, para conseguir el control.Enfoque de sistema para la gestión, para lograr la eficacia.

Mejora continua, para mantener la satisfacción permanente.Enfoque basado en hechos para la toma de de-cisiones, es decir, medir, reportar, analizar y no dejarse llevar por intuiciones ni posiciones sub-jetivas.Relaciones mutuamente beneficiosas con los Pro-veedores, quienes hacen parte del propio servi-cio.

Si la organización, en este caso el laboratorio clínico de biología molecular, independientemente de la nor-ma que haya decidido implementar, es capaz de aplicar todos y cada uno de estos principios, con seguridad se le facilitará contar con un Sistema de Gestión de la Ca-lidad que le permita conseguir resultados médicamente relevantes así como pacientes y clientes altamente satis-fechos con sus servicios.

REFERENCIAS

1. Laboratory biosafety manual, WHO, Geneva, third edition,

2. Decreto 1011 de 2006. Ministerio de Protección so-cial.

3. Decreto 2112 de 2003. Ministerio de Protección so-cial.

4. NtC-ISO 9001: 2008 Sistema de Gestión de la Cali-dad: Requisitos.

5. NtC-ISO 17025: 2005 Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y de la calibración.

6. ISO 15189: 2007 Medical laboratories - Particular requirements for quality and competence.

7. CAP (AMERICAN PAtOLOGISt COLLEGE): Sep. 2007 Molecular Pathology.

8. Molecular Diagnostic Handbook IAEA/FAO 2005.