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ANTIBIÓTICOSANTIBIÓTICOS

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INTRODUÇÃOINTRODUÇÃO

Os primeiros usos datam de 3000 anos atrás.No século XIX, a demonstração da origem infecciosa de algumas doenças estimulou a pesquisa no intuito de se descobrir substâncias específicas no combate dos germes.O termo antibiose foi criado em 1889 para designar processo natural de seleção pelo qual um ser vivo destrói outro para assegurar a sua sobrevivência.Paul Ehrlich, o pai da quimioterapia moderna, elaborou a teoria sobre a ligação dos antimicrobianos a receptores específicos na célula.

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Introdução Salvarsan, derivado do arsênico para o tratamento da sífilis.Em 1912, Gaspar Viana demonstrou que o tártaro emético ( tartarato de antimônio e potássio) possuia atividade terapêutica no tratamento da leishmaniose.No início do século, as sulfas eram usadas como corantes. Em 1932 Gerard Domagk, demonstrou que as sulfas tinham atividade antibacteriana in vivo, utilizando a sulfamidocrisoidina (prontosil rubrum) na terapêutica para tratamento de camundongos.Depois foi descoberto que a substância ativa era sulfanilamida.Com a 2ª guerra houve o desenvolvimento da industria farmacêutica de síntese, originando novos quimioterápicos

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A DESCOBERTA DA PENICILINA

O primeiro antibiótico de utilidade clínica, ocorreu quando Alexander Fleming estudava culturas de Staphylococcus aureus que haviam se contaminado com fungo do gênero Penicillium.

Alexander FlemingColônia de Penicillium

Morfologia do Penicillium notatum

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A Substância liberada por este fungo era filtrável, não tóxica para animais e que exercia atividade antibacteriana contra estafilococos, estreptococos, bacilo diftérico, meningococo e gonococo.Tem início a era da antibioticoterapia, sendo Fleming, Florey e Chain agraciados com o Nobel em 1945. Descoberta da estreptomicina obtida apartir da cultura de actinomicetos (Streptomyces griseus);Cloromicetina a partir do Streptomyces venezuelae obtido a partir da amostra de solo; A partir de síntese química deu origem ao clorafenicol.

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A antibioticoterapia recebeu novo impulso quando foi descoberto um método prático para obtenção de ácido 6-aninopenicilânico (6 APA).A introdução de novos radicais sobre o 6-APA permitiu o surgimento de novos antibióticos penicílinicos, caracterizados por terem parte de sua obtenção realizada pelo processo fermentativo natural e parte resultante de reações químicas. É a era dos antibióticos semi-sintéticos.A meticilina foi a primeira penicilina resistente a ação da lactamases do tipo penicilinases.As pesquisas levaram a descoberta das cefalosporinas que são obtidas apartir do Cephalosporium acremonium, fungo isolado do mar da Sardenha próximo a um cano de esgoto. O núcleo central é ácido 7 aminocefalosporânico (7-ACA)

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Conceito de quimioterapia

abrange as substâncias que são sintetizadas em laboratório, ou de origem vegetal que apresentam baixa toxicidade para as células do hospedeiro e alta para o agente agressor.

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Características do antibiótico ideal:

Atividade antibacteriana sobre amplo espectro de germes;Ser absorvido por via oral e por via parenteral;Ter fácil distribuição pelos tecidos e líquidos orgânicos, atingindo concentração bactericida;Não sofrer inativação por enzimas tissulares;Não provocar efeitos tóxicos, alérgicos ou irritantes no hospedeiro;Não induzir o desenvolvimento de resistência;Não ter efeitos teratogênicos;Produzir concentrações elevadas e por tempo prolongado;Ser facilmente obtido em escala industrial.

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CLASSIFICAÇÃO DOS ANTIBIÓTICOS

Classificação Química:As substâncias do mesmo grupo apresentam mecanismo de ação semelhante, partilharem total ou parcialmente os microrganismos sobre qual atuam (espectro de ação).Existência de reação cruzada entre seus constituintes. Ex.: os Macrolídeos, Tetraciclinas, as cefalosprinas de 1ª geração o clorafenicol e o tiafenicol.Em relação a outros antibióticos isto não ocorre porque estas substâncias podem apresentar determinados radicais na fórmula estrutural que modificam o ponto de ação do mecanismo de resistência cruzada. Ex.: penicilina G e oxacilina frente ao estafilococo produtor de penicilinase.A resistência desta bactéria deve-se a produção de penicilinase que age sobre o anel lactâmico, transformando a penicilina em ácido penicilóico desprovido de ação antimicrobiana

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A oxacilina impede a ação destas enzimas, pois o anel está protegido por radicais mais complexos.Também não é possível prever reações cruzadas entre os aminoglicosídeos, pois existem diversos mecanismos de resistências.O conhecimento de resistência cruzada entre antibióticos é de importância para evitar associação ou substituição de drogas por outra que apresente o mesmo mecanismo de resistência.Avaliação fidedigna do antibiograma. A sensibilidade para o clorafenicol será a mesma para o tiafenicol;As tetraciclinas e as cefalosporinas de 1ª geração; Em geral os macrolídeos, com exceção para o s macrolídeos modernos (claritromicina e a azitromicina)

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TABELA 1- Classificação Química dos Antibióticos

Derivados de aminoácidosMonopeptídeos – ciclosserina;Polipeptídeos – polimixinas, bacitracinas, etc.Aminopropanodiol – Clorafenicol, tiafenicol.ß lactâmicos (beta lactaminas)d.1 ácido 6 aminopenicilânico – penicilinas.d.2 ácido 7 aminocefalosporânico – cefalosporinas.d.3 inibidores de beta lacatamases – ácido clavulânico, tazobactam, sulbactam.d.4 monobactâmicos – Aztreonam, carumonam, etc.e) Glicopeptídios – vancomicina, teicoplamina.B. Derivados de açucaresHeterosídeos macrolídeos – eritromicina, josamicina, rosamicina, roxitromicina, claritromicina, azitromicina.Lincosaminas – lincomicina, clindamicina.Aminoglicosídeos – estreptomicina, canamicina, neomicina, gentamicina, netilmicina, amicacina, tobramicina.Glicosídeos ácidos – novobiocina.Sinergistinas – pristinamicina.C. Derivados de Acetatos e PropionatosPoliênicos – nistatina, anfotericina A, metil-partricina.Aromáticosb.1 Tetraciclinasb.2 Ansamicinas – rifamicinasc) Esteróides – Ácido fusídico.d) Derivados do griano – griseofulvina.D. Outros: Fosfomicina; Variotina.

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Classificação Segundo o Espectro de Ação

Os agentes infecciosos sobre os quais agem os antibióticos são: bactérias, protozoários e fungos .As bactérias podem ser divididas em :Gram positivas, Gram negativas, micobactérias, riquétsias, micoplasmas, espiroquetas e clamidias.Alguns antibioticos possuem ação sobre bactérias (Tetraciclinas) ou fungos (anfotericina B) ou ter ação sobre protozoários. As sulfas possuem efeito bacterióstatico sobre bactérias Gram positivas e Gram negativas.Outros podem ser utilizados em infecções localizadas do aparelho urinário, pois não possuem efeito sistêmico:O ácido nalidíxico, ácido pipemídico, a norfloxacina e a nitrofurantoína.

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TABELA 2.3 -Classificação Segundo o Espectro de Ação

Ativo sobre protozoários: Tetraciclinas, anfotericina B.b) Fungos: nistatina, anfotericina B, griseofulvina.c)Bactérias Gram positivas: penicilinas, macrolídeos, bacitracina.d)Bactérias Gram negativas: polimixinas, aminoglicosídeos.e) Bactérias Gram positivas e Gram negativas (amplo espectro): clorafenicol, tetraciclinas, ampicilinas, cefalosporinas, rifampicina. f) Micobactérias: estreptomicina, rifampicina, claritromicina.g) Riquétsias, micoplasmas e clamidias: Tetraciclinas, clorafenicol, macrolídeos. h) Espiroquetas: Penicilinas, eritromicina, tetraciclina.

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Classificação Segundo o Efeito sobre os Germes

Os antibióticos são classificados em bactericidas e bacteriostáticos.Bacterícidas – provocam ações incompatíveis com a sobrevida bacteriana.Bacteriostáticos – inibem o crescimento e a reprodução bacteriana sem provocar sua morte imediata, sendo o efeito reversível quando a droga é retirada. O efeito bactericida ou bacteriostático é relativo e está a dependência da concentração atingida pela droga no meio onde se situa o microrganismo e da sensibilidade deste. Leva-se em consideração a concentração terapêutica média possível de ser utilizada e a média de germes sobre os quais ela atua.A meticilina tem efeito bactericida sobre bactérias Gram positivas, quando usada na concentração d 2,5 a 5 mcg/ml. Na concentração de 0,05 e 0,5 mcg/ml seu efeito é bacteriostático

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TABELA 2.4 – Principais Opções Antibióticas Contra Bactérias

Bactérias Gram positivas, cocos Gram negativos e espiroquetas: Penicilinas, eritromicina e outros macrolídeos, tetracilclinas.Estafilococos produtores de beta lactamase: Oxacilina, cefalosporinas de 1ª geração, gentamicina ou amicacina, Rifampicina, vancomicina, teicoplamina, lincomicina ou clindamicina.Enterococo: Penicilina G+Gentamicina; Ampicilina+Gentamicina; Vancomicina, Teicoplamina, Tetraciclinas, Clorafenicol.Bacilo Gram negativos: Gentamicina e outro aminoglicosídeos; Clorafenicol, tiafenicol, Tetraciclinas, ampicilina, cefalosporinas, polimixinas, quinolonas, monobactâmicos.Pseudomonas aeruginosa: Gentamicina ou tobramicina ou amicacina; carbenicilina; polimixinas, cefalosporinas de 3ªgeração e 4ª geração; aztreonam; imipenem e meropenenMicobactérias: Rifampicina+ Isoniazida+Pirazinamida ou Etambutol; ciclosserina, estreptomicina, etionamida, Sulfonas.Clamidias, Riquétsias e micoplasmas: Tetraciclinas, clorafenicol, Tiafenicol, eritromicina e outros macrolídeos.Anaeróbios: Penicilinas (exceto para Bacteróides fragilis), clorafenicol,

Clindamicina

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CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA MÍNIMAMÍNIMA

O QUE É MIC? (Concentração Inibitória Mínima) é a menor concentração do agente antimicrobiano que inibe o crescimento do organismo.

Os valores da Concentração Inibitória Mínima (CIM), bacteriostática e bactericida sofrem variações muito grande em função da cepa do germe estudado

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TABELA 5- CIM da cefalexina para Diferentes Cepas de Bactérias

BactériasBactérias NNoo de de cepascepas

CIM (mcgCIM (mcgmL)mL)

>>128 128 64 32 16 8 4 2 1 0,5128 128 64 32 16 8 4 2 1 0,5

E coliE coli 197197 3 1 4 4 29 11 47 2 - -3 1 4 4 29 11 47 2 - -

K pneumoniaeK pneumoniae 108108 2 2 3 2 7 45 39 8 - -2 2 3 2 7 45 39 8 - -

S pyogenesS pyogenes 66 - - - - - - - - - -- - - - - - - - - -

PneumococosPneumococos 1414 - - - - - 3 5 3 1 1- - - - - 3 5 3 1 1

S aureus S aureus sensível a sensível a penicilinapenicilina

1919 - - - - - - 4 6 8 1 - - - - - - 4 6 8 1

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O clorafenicol antibiótico bacteriostático para bactérias Gram negativas alcança concentração linfática duas vezes maior que a do sangue, por isso e bactericida para salmonelas de localização linfática.

Quando um antibiótico considerado bactericida for utilizado em doses menores à recomendada ou a difusão no tecido for inferior, ocorrerá apenas um efeito bacteriostático.

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Teste de Sensibilidade Teste de Sensibilidade AntimicrobianaAntimicrobiana

Um microrganismo é considerado susceptível a Um microrganismo é considerado susceptível a uma droga se for morto ou inibido por uma uma droga se for morto ou inibido por uma concentração da droga facilmente obtida no concentração da droga facilmente obtida no local da infecção (geralmente a concentração local da infecção (geralmente a concentração que a droga atinge na corrente sanguínea.que a droga atinge na corrente sanguínea.Um microrganismo é considerado resistente se Um microrganismo é considerado resistente se puder tolerar a maior concentração de um puder tolerar a maior concentração de um antibiótico que se obtém na corrente sanguínea.antibiótico que se obtém na corrente sanguínea.Acredita-se que esta concentração seja de duas Acredita-se que esta concentração seja de duas a quatro vezes a concentração que seria a quatro vezes a concentração que seria suficiente para matá-lo. suficiente para matá-lo.

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Técnicas de AntibiogramaTécnicas de Antibiograma

Método das diluições em tubo:Método das diluições em tubo:Meio de cultura- Caldo Mueller- Hinton ou caldo de Meio de cultura- Caldo Mueller- Hinton ou caldo de tripticase-soja para germes comuns e tioglicolato para tripticase-soja para germes comuns e tioglicolato para estreptococos anaeróbios, clostrídeos e outros estreptococos anaeróbios, clostrídeos e outros anaeróbios.anaeróbios.Preparar soluções concentradas das drogas a serem Preparar soluções concentradas das drogas a serem testadas (em geral 1.000 unidades por mL)testadas (em geral 1.000 unidades por mL)Diluir 1:10 no próprio meio de cultura quando for usar;Diluir 1:10 no próprio meio de cultura quando for usar;O pH final deve estar entre 7,2 e 7,4.O pH final deve estar entre 7,2 e 7,4.Geralmente 1 unidade está contida em 1 micrograma, Geralmente 1 unidade está contida em 1 micrograma, com exceção para penicilina onde a potência de 0,6 com exceção para penicilina onde a potência de 0,6 micrograma equivale a 1 unidade. micrograma equivale a 1 unidade.

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Para cada antibiótico são necessários uma série Para cada antibiótico são necessários uma série de 12 tubos de 12 mm estéreis contendo 0,5 mL de 12 tubos de 12 mm estéreis contendo 0,5 mL do meio de cultura líquido.do meio de cultura líquido.

Nos tubos 1 e 2 pipetar 0,5 da solução de Nos tubos 1 e 2 pipetar 0,5 da solução de antibiótico contendo 100 microgramas por mL.antibiótico contendo 100 microgramas por mL.

Misturar o conteúdo do tubo 2 e transferir 0,5 Misturar o conteúdo do tubo 2 e transferir 0,5 mL para o tubo 3.mL para o tubo 3.

Continuar este procedimento até o tubo 11.Continuar este procedimento até o tubo 11.

Em seguida pipetar em todos os tubos do Em seguida pipetar em todos os tubos do inóculo (cultura de 24 horas em caldo com 10inóculo (cultura de 24 horas em caldo com 1055 a a 10106 6 bactérias por mL) menos no tubo 11.bactérias por mL) menos no tubo 11.

Incubar a 37º C por 18 a 24 horas. Incubar a 37º C por 18 a 24 horas.

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Observar o tubo 11- deve estar límpido;Observar o tubo 11- deve estar límpido;O tubo 12 ( controle da cultura)- Deve O tubo 12 ( controle da cultura)- Deve apresentar crescimento bacteriano;apresentar crescimento bacteriano;Se houver ação da droga sobre o Se houver ação da droga sobre o microrganismo, os tubos iniciais estarão microrganismo, os tubos iniciais estarão límpidoslímpidosO primeiro tubo que apresentar crescimento O primeiro tubo que apresentar crescimento demonstra que na concentração do antibiótico demonstra que na concentração do antibiótico que corresponde a este tubo não houve inibição que corresponde a este tubo não houve inibição do crescimento.do crescimento.O tubo anterior ainda límpido corresponde à O tubo anterior ainda límpido corresponde à mínima concentração de antibiótico que é mínima concentração de antibiótico que é inibitória para determinada bactéria. (CIM) inibitória para determinada bactéria. (CIM)

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Método de Difusão com Discos Método de Difusão com Discos (Kirby-Bauer)(Kirby-Bauer)

Consiste na inibição do crescimento de Consiste na inibição do crescimento de um microrganismo na superfície de um um microrganismo na superfície de um meio inoculado, ao redor de um disco de meio inoculado, ao redor de um disco de papel de filtro impregnado com uma papel de filtro impregnado com uma droga.droga.Meio cultura- Mueller-Hinton;Meio cultura- Mueller-Hinton;O pH do meio deve está entre 7,2 e 7,4;O pH do meio deve está entre 7,2 e 7,4;Para alguns microrganismos podemos Para alguns microrganismos podemos usar ágar sangue ou ágar chocolate.usar ágar sangue ou ágar chocolate.

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Inóculo- Usar sempre colônias representativas Inóculo- Usar sempre colônias representativas da população em estudo;da população em estudo;

Disco de antibióticos- Produzidos por indústrias Disco de antibióticos- Produzidos por indústrias controlados oficialmente pelas autoridades dos controlados oficialmente pelas autoridades dos países produtores.países produtores.

Potência- Alta concentração, pois corresponde Potência- Alta concentração, pois corresponde ao maior nível sanguíneo atingido pela droga no ao maior nível sanguíneo atingido pela droga no decurso do tratamento usual. decurso do tratamento usual.

Leitura- É necessário que o halo de inibição Leitura- É necessário que o halo de inibição ultrapasse um certo diâmetro, variável para ultrapasse um certo diâmetro, variável para cada antibiótico .cada antibiótico .

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