isolamento e identificação dos estafilococos. importância clínica dos estafilococos...

Isolamento e identificação dos Estafilococos

Importância Clínica dos EstafilococosStaphylococcus aureus

Intoxicação alimentar (produção de enterotoxinas)Síndrome do choque tóxicoInfecções hospitalaresOsteomieliteEndocarditeBacteremia

MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina)VRSA (Staphylococcus aureus resistente à vancomicina)VISA (Staphylococcus aureus com resistencia intermediária à vancomicina)

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus

Abcessos

Síndrome da pele escaldada

Toxina: Esfoliatina

Intoxicação alimentar

Síndrome do choque tóxico

Isolamento dos Estafilococos

Staphylococcus aureus

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus

Identificação de Estafilococos

1) Prova da Catalase

2) Prova da Coagulase

3) Resistência à Novobiocina

4) Crescimento em ágar Manitol

5) Prova da DNAse

Prova da Catalase

Conversão de peróxido de hidrogênio a 3% em água e oxigênio pela ação da catalase.

2H2O2 H2O + O2

+Estafilococos

-

Estreptococos

OBS: Cuidado para não coletar ágar sangue junto com a colônia usada no teste falso positivo porque o sangue do agar contém catalase.

Prova da Catalase

Staphylococcus spp Streptococcus spp

S. epidermidisS. saprophyticus

Fibrinogênio Fibrina

+ -

S. aureus

Prova da Coagulase

Inocular colônia de bactéria em plasma de coelho incubar 37 ºC por 1-4 horas e observar formação de fibrina

Prova da coagulase em tubo

Staphy test

Ágar Manitol (7,5% NaCl)

Manitol salgado

Crescimentoe fermentação

(amarelo)

Sem Crescimentoou sem fermentação (rosa ou vermelho)

S. aureus S. epidermidisS. saprophyticus

Ágar Manitol (7,5% NaCl)

Prova da DNAse

Ágar DNAse

S. aureus

+ -

S. epidermidisS. saprophyticus

Semear uma colônia em ágar DNAse e incubar a 35 graus por 24 horas. No momento da leitura adicionar HCl 1N sobre a placa, aguardar 30 segundos e observar a formação de um halo claro ao redor da colônia.

PROVA DA DNAse

Prova de sensibilidade à Novobiocina

Ágar Mueller-Hinton com disco de Novobiocina (5 microgramas)

Sensível( - ) Resistente

(+)

S. aureus

S. epidermidisS. saprophyticus

Tabela para identificação de cocosGram + Catalase +

(Staphylococcus spp.)

Coagulase Manitol DNAse Novobiocina

S. aureus + + + Sensível

S. epidermidis - - - Sensível

S. saprophyticus - - - Resistente

Todos são Catalase +

Identificação de MRSA

• Teste de sensibilidade à oxacilina• Teste de sensibilidade à cefoxitina• PCR para o gene mecA• Detecção de PBP2a por aglutinação

Teste de sensibilidade à oxacilina e cefoxitina

PCR para mecA

Aglutinação – Slidex (Biomerieux)