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CONCEITOS DEEXPRESSÃO GÊNICA
Jorge Mondego
DNA
A TC
GTA
G C
DNA: livro da vida, escrito com 4 letras: A T C G
células núcleo cromossomos DNAorganismo
Paradigma Central
DNA RNA Proteína
Nucleotídeos Nucleotídeos Aminoácidos
Transcrição TraduçãoReplicação
Em eucariotos
Em procariotos
Em eucariotos
DNA nuclear
DNA mitocondrial e plastidial – circular(origem endossimbiótica)
Condensação do DNA
Histonas
Cromossomos
Agregação do DNA
Estrutura de Ácidos Nucleicos
Nucleotídeos
5’
3’
Purinas
Estrutura de Ácidos Nucleicos
Bases nitrogenadas
Pirimidinas
Estrutura de Ácidos Nucleicos
Açúcares
5´5´end
3´end
Replicação do DNA
- Abertura de dupla hélice
- Aparato de enzima de replicação
- Cada fita de DNA gera uma fita “filha”
- Forquilha de replicação
- DNA polimerase
- Necessidade de um iniciador ( primer)
- Adição de um nucleotideo trifosfato
- Formação de ligação fosfodiéster
- 5’ para 3’
- Liberação de um difosfato
Mecanismo básico dareplicação
Elementos do aparatode replicação
Regulação da Expressão Gênica
promotor codificante terminadora
...ATCGTGATATACTAGACGATGCATGACCACCCAACTGAACTGTAACTTTAAC...
A estrutura de um gene
Onde:folharaiz
Quando:início germinaçãoataque inseto
Quanto:muito, pouco.
O que:proteína bactericidaabsorção de Fesíntese açúcar
Final do gene
...ATCGTGATATACTAGACGATGCATGACCACCCAACTGAACTGTAACTTTAAC...
Baseado em slide de Marcelo Menossi
Transcrição
Transcrição
- Ligação de maquinaria básica no core do promotor
- Abertura de dupla hélice
- Síntese a partir de fita molde (antissense)
Transcrição em procariotos
Policistron – Um RNA mensageiro contêm a informação de vários genes
Transcrição em eucariotos
Monocistron – Um RNA mensageiro contêm a informaçãode “um único” gene
Promotores e Transcrição em Procariotos
-TATA Box: 10 pb a montante do sítio de início de transcrição
Fita codificante
Fita molde
30
Promotores e Transcrição em Eucariotos
-TATA Box: 25 a 30 pb a montante do sítio de início de transcrição
- Promotores em eucariotos mais primitivos
- Promotores em eucariotos superiores
Estrutura da região codificante
3’ Untranslated region5’ Untranslated region
Seqüência codificante
Proteína
5´ UTR
- Sítio de ligação de proteínas – Estabilidade do mRNA e ajuda da tradução
- Promove o início da transcrição
3´ UTR
- Sítio de ligação de proteínas – Estabilidade do mRNA e ajuda da tradução
-Sítio de poliadenilação (AAUAAA)
- Sítio de ligação de MicroRNAs – Regulação negativa da tradução
Capping 5’
Defosforilação
Guanilyl transferasetransferase
Metilação
a) Distingue mRNAs dos outros RNAs
b) Protege região 5´
Importância do Capping 5´
c) Ajuda no transporte do mRNA para o citoplasma
d) Importante durante tradução
Poliadenilação
http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnaprocessi ng/index.htm
Importância da Poliadenilação
a) Ajuda na terminação da transcrição
b) Protege região 3´
c) Ajuda no transporte do mRNA para o citoplasma
d) Importante durante tradução
Exons e Introns
Splicing
Exons Introns
Expressed Interveining
Expresso Intron metido
GU AG
nnnnnAnnnnCTCTCTCTnnn
Branch point Trato de polipirimidina
Mecanismo de Splicing
http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnasplicing /movie.htm
Splicing Alternativo
Retenção de íntron
Plasticidade do transcriptoma
Splicing Alternativo
Retenção de Íntron
Éxons alternativos
Sítios de poliadenilação alternativos
Seleção alternativa de promotores
Complexidade dos organismos x
Tamanho dos íntrons
Transporte do mRNA
Tradução e código genético
Códonsunidades de três nucleotídeos que codificam para um único aminoácido
AUGUUUAAA CCCM F K P M F K P
Tradução e código genético
RNA transportador e os anticódons
Alanine Alanine
Dois RNAs transportadores carregam o mesmo aminoáci do !
GCC GCU
A
Degeneração do código genético :Dois códons diferentes originam o mesmo aminoácido
Subunidade grandeProcariotos (23S)Eucariotos (28S)
Subunidade pequenaProcariotos (16S)Eucariotos (18S)
Ribossomose a tradução
RNA ribossômicoe
Proteínas
A – AminoacidB – tRNAC – AnticodonD – CodonE – mRNAF – RibosomeG – Protein
http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/047000379 0/animations/animations.htm
AUGUUUAAA CCCGGGACGTACUGAM F K P G T Y stop
Open Reading Frame – Matriz aberta de leitura
As ORFs são seqüências codificantes em potencial po r possuírem
-Códon de iniciação-Região codificadora-Códon de terminação
Direcionamento de proteínas
Expressão gênica e estrutura do DNA
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