aa_icp_gc

Alguns metais alcalinos e alcalino-terrosos tmespectros simples podem ser determinados porfotmetro de chama;

De construo mais simples usam filtros temmenor custo;

So aparelhos que podem ser utilizados para adeterminao de sdio e potssio (solos) tambmestes elementos e ainda clcio em soro sanguneo,urina e outros fluidos biolgicos;

Fotmetro de Chama

Esquema de um Fotmetro de Chama

Diferenas entre Fotmetro de Chama e AA

SimSimPadres

SimNoLmpadas

ppm, ppbppmConcentrao

Mistura gasesAr/GLPChama

Quase todosNa, K, Li, CaElementos

AAFotmetro de Chama

Espectrometria de Absoro Atmicacom Forno de Grafite

Atomizao Eletrotrmica

Em tubos de grafite eletricamente aquecidos a corrente soberapidamente a temperatura se eleva at 2.000 oC ou 3.000 oC aatomizao da amostra ocorre em perodos de tempo de segundos oumilisegundos;

Forno de Grafite no forno so injetados de 1 a 100 L de amostra;

Para evitar a oxidao do grafite passa-se argnio ou nitrognio noseu interior;

O esquema do espectrofotmetro de AA com forno de grafite omesmo, apenas substituindo-se o sistema nebulizador/queimador peloforno de grafite;

Espetrofotmetro de AA com Forno de Grafite

Fonte de Radiao

( )

Monocromador Detector

Dispositivo de Leitura

Tubo de grafite Eletricamente

Aquecido

Abertura paraIntroduo da

Amostra

Amplificador

Forno de Grafite

Espectrofotmetro de AA com Forno de Grafite

Espectrometria de Absoro Atmica

Vantagens do atomizador por forno de grafite:

Os tomos volatilizados ficam mais tempo no tubo de grafite;

Aumento no limite de deteco da anlise em 100 vezes, quando comparado com atomizadores com chama;

Exemplo: Elemento Ferro Fe

Limite de deteco por AA chama: 0,02 g / mL

Limite de deteco por AA forno de grafite: 0,20 ng / mL

Unidades de Concentrao

ppm partes por milho

1mg/1000mL

1mg/L

0,001g/L

ppb partes por bilho

1 g/1000mL

1 g/L

0,001mg/L


Desvantagens AA por forno de grafite:

Alto custo forno de grafite tem que ser substitudo

desgasta com o uso dependendo da amostra pode ser

utilizado de 200 a 500 vezes;

Cada tubo custa cerca de 20 a 50 dlares (sem taxa importao);

As partes que compem o sistema do forno, como cones e

sensores, precisam ser trocadas de 3 a 12 meses, dependendo

do uso custo: 1.000 a 2.000 dlares (sem taxa importao);

Mais difcil de ser operado;


Amostras para AA:

Podem ser analizadas amostras slidas, lquidas ou gasosas todas devem ser convertidas em soluo para a anlise;

Quantidade de amostra: microlitros de lquidos ou miligramas deamostra;

Tempo de anlise: 10 s para AA com chama e 2 minutos para

forno de grafite;

Preciso: depende da complexidade da matriz 1%


Limitaes AA:

No fornece informaes sobre a forma qumica do metal (especiao);

A preparao de amostras pode ser demorada;

Tcnica limitada a metais e metalides;

Tcnica destrutiva da amostra;

Custo do aparelho: forno de grafite > chama;


Aplicaes da AA:

Amostras biolgicas:

anlise de metais em soro sanguneo, em protenas, tecidos vegetais, etc tcnicas de abertura adequadas;

Amostras inorgnicas:

Metais, ligas metlicas, amostras geoqumicas, solo digesto cida para preparar a amostra;

Anlise de gua: controle de qualidade de guas potveis, efluentes industriais, determinao de componentes metlicos em quantidades-trao na gua de rios, mares, lagos, etc.

Elementos Determinados por AA

Anlise do Mercrio por AA

Anlise do mercrio no pode ser feitadiretamente usa-se a tcnica do vapor frio

O mercrio deve ser convertido a Hg2+ portratamento da amostra com mistura oxidante deHNO3 / H2SO4 seguida pela reduo do Hg

2+ a metalcom SnCl2;

O mercrio elementar varrido em um tubo deabsoro por borbulhamento com uma corrente degs inerte atravs da mistura na qual o elementofoi formado vapor.

Podem ser determinadas concentraes demercrios na ordem de nanogramas (10-9 g);

Aparelhagem para Anlise do Mercrio por Vapor Frio

Gs Inerte

Anlise de Arsnio, Antimnio, Estanho, Selnio, Bismuto e Chumbo

So compostos altamente txicos emnveis baixos de concentrao;

Utilizada a tcnica de gerao dehidretos melhora os limites dedeteco destes elementos num fatorde 10 a 100;

Gerador de Hidretos

+Hidretos dos

metais

Anlise via AAAmostra com

As, Se, Sb, Sn,

Pb, Bi em H2O

(3 BH4- + 3H+ + 4 H3AsO3 3 H3BO3 + 4 AsH3 + H2O

Gerador de

Hidretos

Gerador de Hidretos

Espectrometria de Emisso

Atmica

Espectrometria de Emisso Atmica

Espectrometria de Emisso Atmica (Atomic EmissionEspectrometry AES);

Quando tomos so excitados na chama retornam ao estadode menor energia emitem linhas espectrais (energia) quepodem ser utilizadas na anlise quantitativa e qualitativa doelemento;

Estado fundamental

E

Excitao Emisso

on no estadoexcitado

on no estadofundamental

1

2

3


Espectrometria de emisso baseada em plasma atomizao eemisso provocada por fonte de plasma indutivamente acoplado(ICP Inductively Coupled Plasma);

Espectrometria de emisso atmica por plasma indutivamenteacoplado ICP/AES;

Um aparelho de ICP/AES tem como componentes principais:

Sistema de introduo de amostra;

Tocha e conexes;

Gerador de radiofrequncia;

Sistema ptico;

Sistema de deteco;

Sistema computacional;

Diagrama de um Espectrmetro ICP

Esquema do Nebulizador/Tocha do ICP


Plasma mistura gasosa condutora de eletricidade, que contmuma concentrao significativa de ctions e eltrons;

O queimador do plasma formado possui uma bobina deradiofreqncia de duas voltas ao redor do tubo de quartzo;

O gs Argnio de alta pureza alimentado pelo gs de entradado plasma;

Aps um fasca da bobina de radiofreqncia o gs Argnio seioniza, os eltrons livres so acelerados pelo potente campo deradiofreqncia;

Os eltrons acelerados colidem com os tomos e transferem suaenergia para o gs inteiro; esta coliso entre as espciespresentes causa o aquecimento;


Esta acelerao mantm a temperatura entre 6.000 a 10.000 K;

Esta temperatura to alta que suficiente para excitar a

maioria dos elementos qumicos;

Na teoria, todos os elementos da tabela peridica podem ser

determinados por ICP, mas na prtica h restries (elementos

produzidos artificialmente, gases inertes e oxignio);

Os plasmas so utilizados quase que exclusivamente para a

emisso e no para a absoro;

Foto da Chama do ICP


Esta temperatura to alta que o queimador deve ser protegidopor um gs refrigerante que circula externamente ao queimador;

Vantagens do Plasma Indutivamente Acoplado:

Como as temperaturas do ICP so maiores do que a tcnica deatomizao por chama a estabilidade e o ambiente de argnioquimicamente inerte eliminam a maioria dos interferentes;

A temperatura da chama suficiente para excitar a maioria doselementos qumicos, ainda cloro, bromo, iodo e enxofre;

Podem ser determinados simultaneamente vrios elementosqumicos;

Limite de Deteco para Diferentes Elementos Qumicos por ICP


Mtodo que permite determinar elementos que no podem serdeterminados por AA por chama: xidos de boro, fsforo,tungstnio, urnio, zircnio e nibio so altamente resistentes decomposio trmica;

Comparao AA Chama / AA Eletrotrmica / AES-ICP:

Limite de deteco do on Ni+:

Por AA chama: 5 ng/mL

Por AA forno de grafite: 0,02 ng/mL

Por ICP/AES: 0,4 ng/mL

Comparao entre os Limites de Deteco para Absoro Atmica por Chama, Forno de Grafite e

Emisso por Plasma


Versatilidade da tcnica AES-ICP:

Permite no s determinar grande nmero de elementos rpida esimultaneamente, em nveis de traos, mas tambm variedadede tipos e origens de amostras que podem ser analisados;

Aplicaes em agricultura, alimentos, medicina, biologia,geologia, metais e ligas;

meio ambiente: determinao de elementos maiores, menores etraos, solos, esgotos industriais, domsticos, poeiras, ar, guas;


Quantidade de amostra necessriapara anlise em ICP:

Slidos: 50 mg dissolvidos em 50 mLde soluo;

Lquidos: 2 mL;

Cromatografia Gasosa (CG) e

Cromatografia Lquida de Alta

Eficincia (CLAE)

Cromatografia

Introduo

Cromatografia: mtodo de separao dos componentes de umamistura, realizada atravs da distribuio destes componentesentre duas fases que esto em contato direto;

Uma das fases permanece estacionria enquanto a outramove-se atravs dela;

Durante a passagem da fase mvel sobre a fase estacionria os componentes da mistura so distribudos entre duas fases ecada um dos componentes seletivamente retido pela faseestacionria, resultando em migraes diferenciais destescomponentes;

Princpio de Funcionamento da Cromatografia em Coluna

Espcie A(Polar)

Espcie B(Pouco Polar)

Suporte Slido com Fase Estacionria

Polar

Superfcie da coluna

A e B so Arrastadospor um Solvente(gs ou lquido)

A Espcie BPassa pela

Coluna

A Espcie A Fica Retida na Coluna e Sai

Depois de B

a) Adsoro b) Partio

Mecanismos Cromatogrficos

c) Troca Inica


d) Bioafinidade e) Excluso


Cromatografia

Entre os mtodos modernos de anlise, a cromatografia ocupa umlugar de destaque facilidade em efetuar a separao,identificao e quantificao das espcies qumicas, sozinha ou emconjunto com outras tcnicas instrumentais, comoespectrofotometria IV ou espectrometria de massas;

Exemplos de Aplicaes da Cromatografia:

Permite separar e identificar compostos orgnicos obtidos a partirde extratos vegetais, como os alcalides de uso medicinal;

Permite separar e identificar os componentes presentes na gasolina(anlise da gasolina);

Cromatografia

Permite identificar drogas presentes em fluidos orgnicos (exameanti-doping);

Permite analisar e quantificar princpios ativos em frmacos; etc.

Em Qumica Ambiental: anlise qualitativa e quantitativa decompostos orgnicos poluentes na gua (pesticidas, compostosclorados, herbicidas, fungicidas); poluio do ar (aldedos,cetonas, hidrocarbonetos, compostos aromticos); poluio dosolo;

Na indstria de alimentos: anlise dos constituintes dosalimentos: lipdeos e carbohidratos, vitaminas, aminocidos;pesquisa de poluentes em alimentos;

Cromatografia

Classificao dos Mtodos Cromatogrficos

So classificados de dois modos:

a) no meio fsico no qual as fases estacionria e mvel entramem contato: cromatografia em coluna e cromatografia planar;

Cromatografia em coluna: a fase estacionria mantidadentro de um tubo estreito atravs do qual a fase mvel forada a passar sob presso;

Cromatografia planar: a fase estacionria suportada sobreuma superfcie plana ou nos interstcios de um papel; neste caso,a fase mvel move-se por ao de capilaridade ou sob ainfluncia da gravidade;

Cromatografia

b) nos tipos de fase mvel e estacionria e nos tipos de equilbrioenvolvidos na transferncia de solutos entre as fases;

Neste caso, pode-se classificar a cromatografia em:cromatografia lquida, cromatografia gasosa e cromatografia comfluido supercrtico.

Eluio Cromatogrfica em Colunas:

A eluio envolve a lavagem de uma espcie atravs da colunapor adio contnua de novos volumes de solvente;

Cromatografia Gasosa

Na cromatografia gasosa (CG) gases ou substncias volatilizveis soseparados baseando-se na diferente distribuio dos componentes daamostra entre uma fase estacionria (slida ou lquida) e uma fase mvel(gasosa);

A amostra, atravs de um sistema de injeo, introduzida em umacoluna contendo a fase estacionria;

O uso de temperaturas convenientes no local de injeo da amostra e dacoluna possibilita a vaporizao destas substncias, que, de acordo comsuas propriedades e as da fase estacionria, so retidas por temposdeterminados e chegam sada da coluna em tempos diferentes;

O uso de um detector adequado na sada da coluna torna possvel adeteco e quantificao destas substncias;

Diagrama de um Cromatgrafo Gasoso

Cromatgrafo Gasoso

Forno da Coluna Aberto


A tcnica usada na CG a eluio feita por um fluxo de umgs inerte (gs de arraste), que atua como fase mvel; este gs normalmente o He, N2 ou H2;

A fase mvel no interage com o analito; sua funo transportar o analito atravs da coluna;

H dois tipos de cromatografia gasosa: cromatografia gs-slido(GSC) e cromatografia gs-lquido (GLC);

Princpio de Funcionamento da Cromatografia Gs-slido

Espcie A(Polar)


Suporte Slido: Fase Estacionria

Polar

Superfcie da coluna

A e B so Arrastadospor um Solvente

(gs He, N2)


Depois de B

A Espcie BPassa pela

Coluna

Espcie A(Polar)


Suporte Slido Recoberto por uma Fase Estacionria

Lquida Polar

Superfcie da coluna

A e B so Arrastadospor um Solvente

(gs He, N2)


Depois de B

Princpio de Funcionamento da Cromatografia Gs-lquido


Como a espcie A fica retida por mais tempo nacoluna do que a espcie B B chega primeiroao detector e depois chega a espcie A gerado o cromatograma com os picosequivalentes s espcies A e B;

Cromatograma Intensidade do sinal x tempode reteno das espcies na colunacromatogrfica;


Sinaldo

Detector

Tempo

to t1 t2 t3 t4 t5

Tempo de Sada da Espcie B

Tempo de Sada da Espcie A

Cromatograma de Pesticidas Clorados


Coluna Cromatogrfica

A coluna cromatogrfica um tubo longo, contendo afase estacionria; este tubo pode ser de cobre, aoinox, alumnio, vidro, slica fundida, teflon, etc.

As colunas podem ser classificadas em recheadas(analticas e preparativas) e capilares;

Colunas capilares: feitas de slica fundida (SiO2) erecobertas com poliimida (plstico que resiste at350 oC);


As colunas capilares de parede recoberta: formada por um filme deespessura de 0,1 a 5 m de fase estacionria lquida na parede interna dacoluna;

Fases estacionrias lquidas comuns: baseadas na regra semelhantedissolve semelhante ;

Exemplo: Carbowax (poli(etilenoglicol) ( CH2CH2 O )n

Colunas recheadas: usam um suporte slido so as terras diatomceas, o teflon e as esferas de vidro;

Atualmente, as colunas recheadas so construdas de ao inox ou vidro;

So teis para separaes preparativas, quando necessria uma grande quantidade de fase estacionria ou para separar gases que so pouco retidos;

Coluna Cromatogrfica

Colunas Cromatogrficas


A eficincia de uma coluna cromatogrfica medida em termos denmero de pratos tericos;

Um prato terico corresponde a uma etapa de equilbrio dasubstncia entre a fase estacionria e fase mvel;

Quanto maior o nmero de pratos tericos maior ser aeficincia (picos mais estreitos) na anlise;

Exemplo:

Coluna com filme espesso de 0,25 0,32 mm nmero depratos tericos: 4.000 pratos / m


Algumas caractersticas fsicas de uma colunacromatogrfica:

0,001 0,50,2 20 Volume da amostra ( L)

0,5 25Espessura do filme lquido ( m)

3.0002.400Pratos Tericos por metro

10 1001 3Comprimento (m)

0,15 0,751 4Dimetro Interno (mm)

CapilarRecheada AnalticaParmetro


Fase estacionria:

Fase estacionria slida: na cromatografia gs-slido um slidofinamente dividido funciona como fase estacionria;

A separao baseia-se na adsoro fsica e qumica dassubstncias presentes na amostra neste slido e nas suasvolatilidades;

Exemplos:

Fase estacionria: polmeros porosos;

Aplicao: gases e compostos apolares ou polares de cadeiacurta;


Fase Estacionria Lquida:

Um lquido pouco voltil, recobrindo um suporte slido, funcionacomo fase estacionria;

Os suportes mais utilizados so terras diatomceas: slicamicroamorfa com pequenas quantidades de alumina e xidosmetlicos como impurezas;

Exemplo:

Fase estacionria lquida: Carbowax: polietilenoglicol

Polaridade: polar

Aplicao: lcoois, teres, glicis, solventes

Temperatura de operao: 60 at 220 oC


Aplicaes da Cromatografia Gasosa (Gs-Lquido)

Para a realizao de separaes analticas: aplicao sistemasbioqumicos, complexos organo-metlicos ou orgnicos;

Para realizar uma anlise completa: neste caso, tempos ouvolumes de reteno so empregados para identificaoqualitativa; alturas ou reas de picos fornecem informaesquantitativas;

Para anlises qualitativas, a cromatografia gs-lquido podefornecer mais informaes teis, quando o cromatgrafo a gs conectado a um espectrmetro de massa, infravermelho e RMN.


Na anlise qualitativa compara-se o tempo ou volume de reteno deum padro com o da amostra; se um composto conhecido possuir omesmo tempo de reteno que um dado composto da amostra, pode-setratar da mesma substncia;

Na anlise quantitativa faz-se a integrao dos sinais (picos) paratransformar a intensidade do sinal emitido pelo detector em uma medidarelacionada com a quantidade da substncia analisada na amostra medida da rea do pico;

Relao entre a rea do pico e concentrao vrios mtodos;

Calibrao externa: compara a rea da substncia a ser quantificada naamostra com as reas obtidas desta mesma substncia em soluespadro de concentraes conhecidas grfico rea x concentrao;


to t1 t2 t3 t4 t5

Tempo

Sinaldo

Detector

Mtodos para Realizao de Anlise Quantitativa

Clculo da rea do pico Calibrao externa

Calcula-se area do pico


Com a rea do pico determinada, constroi-seuma curva de calibrao rea do pico xconcentrao linha reta;

Compara-se a rea da substncia a serquantificada na amostra com as reas obtidasdesta mesma substncia em solues padrode concentraes conhecidas;


Concentrao

rea

C1 Cx C3

A1

Ax

A3

Mtodo da Calibrao Externa


Sistemas de Deteco em Cromatografia Gasosa:

As substncias presentes na amostra passam atravs da coluna,onde so separadas, e chegam ao sistema de deteco;

Existem vrios sistemas de deteco;

Deve-se escolher o detector que melhor se adapta ao tipo de anlisea ser realizada;

Algumas caractersticas importantes na escolha do detector:

seletividade: os detectores podem responder a todas as substncias,medindo a variao da composio do gs de arraste que sai dacoluna;

Existem detectores que so universais e outros especficos para umaclasse de substncias;


Sensibilidade: mudana na resposta do detector em funo daquantidade detectada;

quantidade mnima detectvel: alguns detectores conseguemdetectar quantidades de substncia na faixa de picogramas(10-12 g) ou menos, e outros apenas 10-8 g;

Detector por ionizao em chama (FID Flame IonizationDetector):

Muito utilizado alta sensibilidade e resposta universal;


Princpio de funcionamento:

O gs de arraste chega ao detector e uma chama produzida pelacombusto de ar e hidrognio queima e ioniza algumas dasmolculas presentes nesta corrente gasosa;

Quando estas molculas so queimadas estes ons formados socoletados por um eletrodo;

A quantidade de ons formados proporcional concentrao daespcie em estudo;

Quantidade mnima detectvel: 2 x 10-12 g (alcanos);

Detector de Ionizao de Chama

Chama: gs H2 + O2(200 oC)

Tempo de resposta: 1 ms

Seletividade: compostosorgnicos


Outros tipos de detectores: condutividadetrmica (TCD thermal conductivitydetector), captura de eltrons (ECD eletron capture detector), terminico,detector de nitrognio-fsforo (NPD);


Amostras em CG:

Slidas: podem ser dissolvidas em lquidos e injetadas nocromatgrafo;

Lquidas: podem ser diludas, concentradas e injetadas viaseringa no CG;

Pode-se dispor no aparelho de um injetor automtico minimiza os erros que podem ocorrer na injeo manual;

Gases: podem ser introduzidas no CG usando seringaapropriada;


Quantidades de amostra para anlise:

Lquidos: seringas de 10 nL at 10 L; sistemas de injeoautomtica: atravs de sistemas de vlvulas 0,2 L at 1mL;

Gases: seringas de 10 L at 25 mL;

Injetores automticos: 0,250 at 10 mL;

Tempo de anlise: menos de 1 minuto at 1 ou 2 horas;

Muitas anlises duram de 20 a 60 minutos;


Preciso das anlises: depende do tipo de injeo, coluna e detectorutilizado de 0,3% a menos de 3%;

Sensibilidade e limite de deteco: depende do processo de injeo e dosistema de deteco;

Faixas de partes por trilho ou nanogramas por litro at g/L;

A Cromatografia gasosa pode ser utilizada em conjunto com outrastcnicas analticas: CG-espectroscopia de IV por transformada deFourier: CG-FTIR

CG-espectrometria de massa (mass espectrometry): CG-MS;

OU CG-FTIR-MS;

Para a determinao e confirmao das caractersticas estruturais doscompostos em anlise;


Custos da CG:

Cromatgrafo: at US$ 100.000,00;

Colunas: US$ 300 a 1.000,00;

Aplicaes em Qumica Ambiental: determinao debenzeno, tolueno, xileno, pesticidas, herbicidas, inseticidasorganofosforados, dioxinas, furanos, hidrocarbonetos aromticospolinucleares, fenis, compostos volteis no solo, ar e gua;

As Empresas HP e Shimadzu possui catlogo especfico paraaplicaes da CG na rea ambiental;

Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE)

ou

HPLC:

(High-Performance Liquid Chomatography)

Cromatografia Lquida de Alta Eficincia

Princpio da tcnica: a CLAE utiliza uma presso altapara forar a passagem do solvente pelas colunascontendo partculas muito finas que proporcionamseparaes muito eficientes;

O sistema CLAE consiste de um sistema dedistribuio do solvente, uma vlvula de injeo deamostra, uma coluna de alta presso, um detector eum computador para monitorar o sistema eapresentar os resultados;

Reservatrio da Fase mvel (lquido)

Bomba de Alta Presso

Vlvula para Injeo da amostra

Coluna

Detector

Registrador

Medidor de

presso

Esquema de um Cromatgrafo CLAE

Cromatgrafo CLAE

Coluna Cromatogrfica para CLAE


Em CLAE existem cinco tipos diferentes de fasesestacionrias, que implicam em cinco mecanismosdiferentes de realizar a CLAE mediante a troca decoluna e fase mvel possvel utilizar cada um deles;

Cromatografia lquido-slido ou por adsoro;cromatografia lquido-lquido ou por partio;cromatografia lquida em fase ligada, cromatografiapor excluso, cromatografia por troca inica;


Colunas em CLAE:

Comprimento: 10 50 cm;

Dimetro interno:

Coluna analtica: 3 a 5 mm;

Coluna preparativa: 10 mm;

A capacidade da coluna determinada pelo seu comprimento,dimetro e material de recheio


Fases estacionrias em CLAE:

A fase estacionria em CLAE deve ser aqueles que em um menortempo possvel retenham uma mxima capacidade de amostra,do a melhor resoluo na separao da mistura e so de fcilintroduo na coluna;

Slidos base de slica: recheios mais usados;

Slidos semi-rgidos: partculas porosas de poliestirenoentrecruzado com divinilbenzeno;

Slidos no rgidos: agarose ou dextrose;

Exemplo: fase estacionria para CLAE lquido-slido adsoro:


Exemplo: fase estacionria para CLAE lquido-slido adsoro:

Tipo: slica

Nome: Chromsphere

Fornecedor: ChromPack

Dimetro da partcula: 5 m

Tamanho do poro: 12 nm

Volume do poro: 0,7 mL/g

rea da superfcie: 160 m2 / g


Caractersticas da fase mvel em CLAE:

Ser de alto grau de pureza ou de fcil purificao;

Dissolver a amostra sem decompor os seus componentes;

No decompor ou dissolver a fase estacionria;

Ter baixa viscosidade;

Ser compatvel com o tipo de detector utilizado;

Ter polaridade adequada para permitir uma separaoconveniente dos componentes da amostra;


Vantagens e Limitaes da CLAE:

Vantagens:

Menor tempo de anlise;

Alta resoluo: possvel a anlise de misturas complexas (como aurina humana): duzentos compostos podem ser detectados;

Resultados quantitativos: anlises quantitativas so de fcil execuoe grande preciso; desvios relativos inferiores a 0,5%;

Boa Sensibilidade: detectores que permitem medidas de 10-9 g; comdetectores especficos foram obtidos resultados de 10-12 g;


Versatilidade: a mais importante das vantagens da CLAE; podeser aplicada tanto para compostos orgnicos quanto inorgnicos;as amostras podem ser lquidas ou slidas; inicas oucovalentes; gases no podem ser determinados por CLAE;

Automatizao: todo o processo pode ser automatizado, deste ainjeo da amostra at a integrao dos picos;

Limitaes da CLAE:

Alto custo da instrumentao: sistemas mais simples custam deUS$ 7.000 a US$ 20.000, sistemas mais sofisticados,automatizados e com vrios detectores podem passar deUS$ 50.000;


Alto custo de operao: custo elevado das fases mveis de alto grau depureza, das fases estacionrias ou colunas prontas, de reposioperidica de componentes sofisticados;

Difcil anlise qualitativa: a CLAE no um mtodo muito bom deidentificao qualitativa, pois a comparao dos tempos de reteno no um mtodo seguro de identificao; pode-se confirmar a identidade dasubstncia com outras tcnicas, como espectrometria de massas (MS),IV ou RMN;

Falta de detector universal sensvel: ainda no se dispe de um detectorque seja universal e sensvel; o detector de ndice de refrao universal mas no tem sensibilidade satisfatria; o detector porultravioleta sensvel, mas s responde aos componentes que absorvemenergia eletromagntica no selecionado


Necessidade de experincia na operao do cromatgrafo de CLAE:

Para se obter o mximo de aproveitamento de um sistema de CLAE necessrio treinamento adequado e longo: mnimo 6 meses ( nacromatografia gasosa: 3 meses);

Detectores para CLAE: detector por absorbncia no UV-Vis; detector porndice de refrao; detector por fluorescncia;

Detector por absorbncia no ultravioleta e no visvel:

Se baseia na absorbncia da luz por parte da amostra ao passar poratravs dela qualquer radiao eletromagntica;

Dois tipos: detector de comprimento de onda varivel(espectrofotmetro): mais caro; operam na faixa de 190 a 800 nm; somais seletivos e sensveis, pois um pode ser escolhido para ocomposto de interesse absorve mais intensamente;


Detector de comprimento de onda fixo: mais barato; podem trabalhar com em 254 nm e 280 nm;

Caractersticas do Detector UV-Vis:

Quantidade mnima detectvel (g/mL): 2x10-10 a 10-9;

Volume da cela: 1 20 L;

Sensibilidade temperatura: baixa

Sensvel vazo da fase mvel: baixa

Aplicaes: compostos que absorvem no selecionado;


Aplicaes da CLAE:

Medidas de nveis de aminocidos, cidos nuclicos e protenas em amostras fisiolgicas;

Medidas de drogas ativas, bioprodutos sintticos ou produtos de degradao em dosagens farmacuticas;

Medidas de nveis de poluentes, como pesticidas ou inseticidas;

Monitoramento de amostras ambientais;

Purificao de compostos de misturas;

Controle de qualidade;

Separao de polmeros


Amostras em CLAE:

Quantidade: 1 100 L (geralmente 5 10 L);

Tempo de anlise: 5 minutos a 2 horas (geralmente 10 25 min.);

Tcnicas complementares:

A CLAE pode ser utilizada em conjunto com a Espectrometria deMassa (MS), Infrvermelho(IR) ou Ressonncia Magntica Nuclear(RMN) para se obter informaes sobre a estrutura molecular docomposto em estudo;

aa_icp_gc

Documents